生物医学工程学杂志
生物醫學工程學雜誌
생물의학공정학잡지
2004年
6期
1006-1010
,共5页
李敏%黄建坤%涂桂云%黄曦
李敏%黃建坤%塗桂雲%黃晞
리민%황건곤%도계운%황희
蜘蛛%拖丝蛋白%RGD三肽%纯化
蜘蛛%拖絲蛋白%RGD三肽%純化
지주%타사단백%RGD삼태%순화
蜘蛛拖丝是自然界性能最好的蛋白质纤维之一,其独特的机械性能,良好的生物相容性和缓慢的可降解性,作为生物材料在组织工程领域有着潜在的应用前景.本文根据蜘蛛拖丝蛋白序列高度重复的特点,引入与细胞黏附有关的精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸(RGD)三肽,化学合成RGD-蜘蛛拖丝蛋白基因单体,通过头尾相连倍加构建策略,首次得到RGD-蜘蛛拖丝蛋白基因8聚体和16聚体.分别将这两种多聚体与原核高效表达载体pET-30a(+)连接,转化大肠杆菌BL21(DE3)pLysS,用IPTG诱导表达.SDS-PAGE图谱显示表达产物分子量分别为35 KD和60 KD,与理论值基本相吻合;蛋白质印迹分析这两种表达产物均显示特异性.文中对表达产物的纯化方法进行了初步的摸索.
蜘蛛拖絲是自然界性能最好的蛋白質纖維之一,其獨特的機械性能,良好的生物相容性和緩慢的可降解性,作為生物材料在組織工程領域有著潛在的應用前景.本文根據蜘蛛拖絲蛋白序列高度重複的特點,引入與細胞黏附有關的精氨痠-甘氨痠-天鼕氨痠(RGD)三肽,化學閤成RGD-蜘蛛拖絲蛋白基因單體,通過頭尾相連倍加構建策略,首次得到RGD-蜘蛛拖絲蛋白基因8聚體和16聚體.分彆將這兩種多聚體與原覈高效錶達載體pET-30a(+)連接,轉化大腸桿菌BL21(DE3)pLysS,用IPTG誘導錶達.SDS-PAGE圖譜顯示錶達產物分子量分彆為35 KD和60 KD,與理論值基本相吻閤;蛋白質印跡分析這兩種錶達產物均顯示特異性.文中對錶達產物的純化方法進行瞭初步的摸索.
지주타사시자연계성능최호적단백질섬유지일,기독특적궤계성능,량호적생물상용성화완만적가강해성,작위생물재료재조직공정영역유착잠재적응용전경.본문근거지주타사단백서렬고도중복적특점,인입여세포점부유관적정안산-감안산-천동안산(RGD)삼태,화학합성RGD-지주타사단백기인단체,통과두미상련배가구건책략,수차득도RGD-지주타사단백기인8취체화16취체.분별장저량충다취체여원핵고효표체재체pET-30a(+)련접,전화대장간균BL21(DE3)pLysS,용IPTG유도표체.SDS-PAGE도보현시표체산물분자량분별위35 KD화60 KD,여이론치기본상문합;단백질인적분석저량충표체산물균현시특이성.문중대표체산물적순화방법진행료초보적모색.
