生物工程学报
生物工程學報
생물공정학보
CHINESE JOURNAL OF BIOTECHNOLOGY
2005年
1期
139-143
,共5页
刘召华%郭洪年%郑光宇%田颖川
劉召華%郭洪年%鄭光宇%田穎川
류소화%곽홍년%정광우%전영천
TAIL-PCR%ACA启动子%GUS%种子特异表达
TAIL-PCR%ACA啟動子%GUS%種子特異錶達
TAIL-PCR%ACA계동자%GUS%충자특이표체
根据已知的ACA基因的5'端序列设计三个基因特异的反向引物(GSP-1,GSP-2,GSP-3)分别与11个简并引物(AD1-AD11)配对,进行热不对称嵌套PCR(Thermal asymmetric interlaced PCR,TAIL-PCR)扩增,获得了ACA基因起始密码子上游约700bp的片段.为检测其表达特性,构建了该片段与Gus嵌合基因的表达载体pBpAG,在真空条件下通过农杆菌介导,转化了植物的叶、果实、种子三种不同组织,Gus瞬时表达染色结果显示,该DNA片段具有种子特异的启动子活性.对该启动子的一些顺式元件进行了讨论.
根據已知的ACA基因的5'耑序列設計三箇基因特異的反嚮引物(GSP-1,GSP-2,GSP-3)分彆與11箇簡併引物(AD1-AD11)配對,進行熱不對稱嵌套PCR(Thermal asymmetric interlaced PCR,TAIL-PCR)擴增,穫得瞭ACA基因起始密碼子上遊約700bp的片段.為檢測其錶達特性,構建瞭該片段與Gus嵌閤基因的錶達載體pBpAG,在真空條件下通過農桿菌介導,轉化瞭植物的葉、果實、種子三種不同組織,Gus瞬時錶達染色結果顯示,該DNA片段具有種子特異的啟動子活性.對該啟動子的一些順式元件進行瞭討論.
근거이지적ACA기인적5'단서렬설계삼개기인특이적반향인물(GSP-1,GSP-2,GSP-3)분별여11개간병인물(AD1-AD11)배대,진행열불대칭감투PCR(Thermal asymmetric interlaced PCR,TAIL-PCR)확증,획득료ACA기인기시밀마자상유약700bp적편단.위검측기표체특성,구건료해편단여Gus감합기인적표체재체pBpAG,재진공조건하통과농간균개도,전화료식물적협、과실、충자삼충불동조직,Gus순시표체염색결과현시,해DNA편단구유충자특이적계동자활성.대해계동자적일사순식원건진행료토론.
