武汉大学学报（理学版）
武漢大學學報（理學版）
무한대학학보（이학판）
JOURNAL OF WUHAN UNIVERSITY(NATURAL SCIENCE EDITION)
2006年
2期
207-212
,共6页
魏红波%曹军卫%陈明清%刘瑞杰
魏紅波%曹軍衛%陳明清%劉瑞傑
위홍파%조군위%진명청%류서걸
枯草芽孢杆菌耐盐突变株%proA基因突变%渗透压胁迫%脯氨酸合成
枯草芽孢桿菌耐鹽突變株%proA基因突變%滲透壓脅迫%脯氨痠閤成
고초아포간균내염돌변주%proA기인돌변%삼투압협박%포안산합성
将枯草芽孢杆菌93151野生型菌株的proB基因和耐盐突变株93151-14的proA基因,进行体内重组,筛选出含有野生型proB和突变型proA杂合基因的转化子.此杂合基因能够与脯氨酸营养缺陷型大肠杆菌JM83功能互补.分别测定了大肠杆菌JM83三种转化子(分别含有野生型proBA基因,双突变proBA基因和杂合proBA基因)的耐盐能力,发现含有杂合proBA基因转化子的耐盐能力 (0.45 mol/L)尽管比含有双突变proBA基因的转化子(0.5 mol/L)要低一些,但比含有野生型proBA基因的转化子(0.3 mol/L)要高得多.测定了3种转化子在不同盐浓度下生长时的胞内自由脯氨酸含量,发现其含量均随着盐浓度的上升而提高,表明其耐渗透压胁迫能力的提高与胞内自由脯氨酸的积累密切相关.但在相同盐浓度下,含有杂合proBA基因转化子的胞内自由脯氨酸含量要低于含有双突变proBA基因的转化子的胞内自由脯氨酸含量,但明显高于含有野生型proBA基因的转化子的胞内自由脯氨酸含量.说明尽管proB基因的突变在提高细胞耐高渗胁迫的能力中,有重要作用但proA基因的突变也发挥了不可忽视的作用.
將枯草芽孢桿菌93151野生型菌株的proB基因和耐鹽突變株93151-14的proA基因,進行體內重組,篩選齣含有野生型proB和突變型proA雜閤基因的轉化子.此雜閤基因能夠與脯氨痠營養缺陷型大腸桿菌JM83功能互補.分彆測定瞭大腸桿菌JM83三種轉化子(分彆含有野生型proBA基因,雙突變proBA基因和雜閤proBA基因)的耐鹽能力,髮現含有雜閤proBA基因轉化子的耐鹽能力 (0.45 mol/L)儘管比含有雙突變proBA基因的轉化子(0.5 mol/L)要低一些,但比含有野生型proBA基因的轉化子(0.3 mol/L)要高得多.測定瞭3種轉化子在不同鹽濃度下生長時的胞內自由脯氨痠含量,髮現其含量均隨著鹽濃度的上升而提高,錶明其耐滲透壓脅迫能力的提高與胞內自由脯氨痠的積纍密切相關.但在相同鹽濃度下,含有雜閤proBA基因轉化子的胞內自由脯氨痠含量要低于含有雙突變proBA基因的轉化子的胞內自由脯氨痠含量,但明顯高于含有野生型proBA基因的轉化子的胞內自由脯氨痠含量.說明儘管proB基因的突變在提高細胞耐高滲脅迫的能力中,有重要作用但proA基因的突變也髮揮瞭不可忽視的作用.
장고초아포간균93151야생형균주적proB기인화내염돌변주93151-14적proA기인,진행체내중조,사선출함유야생형proB화돌변형proA잡합기인적전화자.차잡합기인능구여포안산영양결함형대장간균JM83공능호보.분별측정료대장간균JM83삼충전화자(분별함유야생형proBA기인,쌍돌변proBA기인화잡합proBA기인)적내염능력,발현함유잡합proBA기인전화자적내염능력 (0.45 mol/L)진관비함유쌍돌변proBA기인적전화자(0.5 mol/L)요저일사,단비함유야생형proBA기인적전화자(0.3 mol/L)요고득다.측정료3충전화자재불동염농도하생장시적포내자유포안산함량,발현기함량균수착염농도적상승이제고,표명기내삼투압협박능력적제고여포내자유포안산적적루밀절상관.단재상동염농도하,함유잡합proBA기인전화자적포내자유포안산함량요저우함유쌍돌변proBA기인적전화자적포내자유포안산함량,단명현고우함유야생형proBA기인적전화자적포내자유포안산함량.설명진관proB기인적돌변재제고세포내고삼협박적능력중,유중요작용단proA기인적돌변야발휘료불가홀시적작용.
