中国药科大学学报
中國藥科大學學報
중국약과대학학보
JOURNAL OF CHINA PHARMACEUTICAL UNIVERSITY
2007年
1期
80-83
,共4页
赵伟%姚文兵%王岷%田浤%高向东%郭寅龙
趙偉%姚文兵%王岷%田浤%高嚮東%郭寅龍
조위%요문병%왕민%전굉%고향동%곽인룡
重组复合干扰素%表达%大肠杆菌%稳定性
重組複閤榦擾素%錶達%大腸桿菌%穩定性
중조복합간우소%표체%대장간균%은정성
目的:在大肠杆菌中高效、稳定地表达复合干扰素(con-IFN).方法:根据大肠杆菌密码子的偏爱性,合成了复合干扰素基因、克隆至表达载体pBV220和转化大肠杆菌DH5α.筛选高表达菌株并传代105次.表达产物经过复性和离子交换;凝胶过滤层析纯化;用细胞病变抑制法测定其活性,并结合lowry法蛋白定量计算其比活性.结果:SDS-PAGE分析显示:重组蛋白在工程菌中表达量为41%,且稳定表达105代.重组蛋白纯化后纯度达到98%,工程菌表达的复合干扰素相对分子质量、末端氨基酸序列及等电点性质与预期结果一致,比活与其商品化产品干复津相当.结论:复合干扰素在大肠杆菌中获得高效、稳定的表达.
目的:在大腸桿菌中高效、穩定地錶達複閤榦擾素(con-IFN).方法:根據大腸桿菌密碼子的偏愛性,閤成瞭複閤榦擾素基因、剋隆至錶達載體pBV220和轉化大腸桿菌DH5α.篩選高錶達菌株併傳代105次.錶達產物經過複性和離子交換;凝膠過濾層析純化;用細胞病變抑製法測定其活性,併結閤lowry法蛋白定量計算其比活性.結果:SDS-PAGE分析顯示:重組蛋白在工程菌中錶達量為41%,且穩定錶達105代.重組蛋白純化後純度達到98%,工程菌錶達的複閤榦擾素相對分子質量、末耑氨基痠序列及等電點性質與預期結果一緻,比活與其商品化產品榦複津相噹.結論:複閤榦擾素在大腸桿菌中穫得高效、穩定的錶達.
목적:재대장간균중고효、은정지표체복합간우소(con-IFN).방법:근거대장간균밀마자적편애성,합성료복합간우소기인、극륭지표체재체pBV220화전화대장간균DH5α.사선고표체균주병전대105차.표체산물경과복성화리자교환;응효과려층석순화;용세포병변억제법측정기활성,병결합lowry법단백정량계산기비활성.결과:SDS-PAGE분석현시:중조단백재공정균중표체량위41%,차은정표체105대.중조단백순화후순도체도98%,공정균표체적복합간우소상대분자질량、말단안기산서렬급등전점성질여예기결과일치,비활여기상품화산품간복진상당.결론:복합간우소재대장간균중획득고효、은정적표체.
