复旦学报（医学版）
複旦學報（醫學版）
복단학보（의학판）
FUDAN UNIVERSITY JOURNAL OF MEDICAL SCIENCES
2007年
2期
228-232
,共5页
石文静%陈超%周国民%胡宝洋%肖虹蕾
石文靜%陳超%週國民%鬍寶洋%肖虹蕾
석문정%진초%주국민%호보양%초홍뢰
早产儿%视网膜病%血管内皮生长因子%碱性成纤维细胞生长因子%雌激素受体%小鼠
早產兒%視網膜病%血管內皮生長因子%堿性成纖維細胞生長因子%雌激素受體%小鼠
조산인%시망막병%혈관내피생장인자%감성성섬유세포생장인자%자격소수체%소서
目的 测定新生小鼠视网膜正常发育及视网膜病时血管内皮生长因子(VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子-2(FGF-2)和雌激素受体(ER)表达的改变,了解它们在早产儿视网膜病(ROP)发病机制中的作用.方法 选择7日龄(P7)C57BL/6J新生小鼠474只,雌雄各半,分为吸氧组和对照组两大组,再按性别分成4小组,用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)测定VEGF、FGF-2和ER的mRNA水平,用免疫组化测定它们的蛋白水平.具体分组及取材时间为:组1(n=126),吸氧组,雌性;组2(n=126),吸氧组,雄性,两组均自吸氧后每天分离视网膜至P21(P8～P21)行RT-PCR,每天摘眼石蜡包埋后行免疫组化;组3(n=111),对照组,雌性;组4(n=111),对照组,雄性,均自P7起每天分离视网膜至P17(P7～P17)行RT-PCR,自P7起每天摘眼至P21(P7～P21)行免疫组化.结果 (1)VEGF mRNA在正常小鼠自P7起上升,P9达高峰,P11起下降并始终维持低水平;在吸氧组自P8起显著下降,且在整个吸氧阶段持续降低,至出氧箱后缓慢上升,自P15起显著上升,并和对照组形成显著差异,受氧浓度的调节非常明显.FGF-2 mRNA在正常小鼠始终维持相对稳定的低水平;在吸氧组,吸氧期间无明显变化,出氧箱后3 d开始上升.ER mRNA在正常小鼠自P7起上升,P9达高峰,P11起下降并始终维持低水平;在吸氧组,吸氧期间变化与对照组相似,出氧箱后5 d开始上升,并维持较高水平直至P21.这3个细胞因子的蛋白水平变化均晚于其基因水平变化,但变化趋势基本相同.(2)性别和吸氧都不能单独影响上述细胞因子的表达(P＞0.05);日龄可独立地影响它们的表达;吸氧和日龄两因素结合起来可显著影响它们的表达(P＜0.000 1).结论 引起ROP发病的根本原因是早产,吸氧是其重要的外因;VEGF、FGF-2和ER参与血管的形成,在视网膜血管正常发育和ROP的发病机制中起重要作用;VEGF直接受氧浓度调节,在众多细胞因子中可能起关键性作用.
目的 測定新生小鼠視網膜正常髮育及視網膜病時血管內皮生長因子(VEGF)、堿性成纖維細胞生長因子-2(FGF-2)和雌激素受體(ER)錶達的改變,瞭解它們在早產兒視網膜病(ROP)髮病機製中的作用.方法 選擇7日齡(P7)C57BL/6J新生小鼠474隻,雌雄各半,分為吸氧組和對照組兩大組,再按性彆分成4小組,用逆轉錄聚閤酶鏈式反應(RT-PCR)測定VEGF、FGF-2和ER的mRNA水平,用免疫組化測定它們的蛋白水平.具體分組及取材時間為:組1(n=126),吸氧組,雌性;組2(n=126),吸氧組,雄性,兩組均自吸氧後每天分離視網膜至P21(P8～P21)行RT-PCR,每天摘眼石蠟包埋後行免疫組化;組3(n=111),對照組,雌性;組4(n=111),對照組,雄性,均自P7起每天分離視網膜至P17(P7～P17)行RT-PCR,自P7起每天摘眼至P21(P7～P21)行免疫組化.結果 (1)VEGF mRNA在正常小鼠自P7起上升,P9達高峰,P11起下降併始終維持低水平;在吸氧組自P8起顯著下降,且在整箇吸氧階段持續降低,至齣氧箱後緩慢上升,自P15起顯著上升,併和對照組形成顯著差異,受氧濃度的調節非常明顯.FGF-2 mRNA在正常小鼠始終維持相對穩定的低水平;在吸氧組,吸氧期間無明顯變化,齣氧箱後3 d開始上升.ER mRNA在正常小鼠自P7起上升,P9達高峰,P11起下降併始終維持低水平;在吸氧組,吸氧期間變化與對照組相似,齣氧箱後5 d開始上升,併維持較高水平直至P21.這3箇細胞因子的蛋白水平變化均晚于其基因水平變化,但變化趨勢基本相同.(2)性彆和吸氧都不能單獨影響上述細胞因子的錶達(P＞0.05);日齡可獨立地影響它們的錶達;吸氧和日齡兩因素結閤起來可顯著影響它們的錶達(P＜0.000 1).結論 引起ROP髮病的根本原因是早產,吸氧是其重要的外因;VEGF、FGF-2和ER參與血管的形成,在視網膜血管正常髮育和ROP的髮病機製中起重要作用;VEGF直接受氧濃度調節,在衆多細胞因子中可能起關鍵性作用.
목적 측정신생소서시망막정상발육급시망막병시혈관내피생장인자(VEGF)、감성성섬유세포생장인자-2(FGF-2)화자격소수체(ER)표체적개변,료해타문재조산인시망막병(ROP)발병궤제중적작용.방법 선택7일령(P7)C57BL/6J신생소서474지,자웅각반,분위흡양조화대조조량대조,재안성별분성4소조,용역전록취합매련식반응(RT-PCR)측정VEGF、FGF-2화ER적mRNA수평,용면역조화측정타문적단백수평.구체분조급취재시간위:조1(n=126),흡양조,자성;조2(n=126),흡양조,웅성,량조균자흡양후매천분리시망막지P21(P8～P21)행RT-PCR,매천적안석사포매후행면역조화;조3(n=111),대조조,자성;조4(n=111),대조조,웅성,균자P7기매천분리시망막지P17(P7～P17)행RT-PCR,자P7기매천적안지P21(P7～P21)행면역조화.결과 (1)VEGF mRNA재정상소서자P7기상승,P9체고봉,P11기하강병시종유지저수평;재흡양조자P8기현저하강,차재정개흡양계단지속강저,지출양상후완만상승,자P15기현저상승,병화대조조형성현저차이,수양농도적조절비상명현.FGF-2 mRNA재정상소서시종유지상대은정적저수평;재흡양조,흡양기간무명현변화,출양상후3 d개시상승.ER mRNA재정상소서자P7기상승,P9체고봉,P11기하강병시종유지저수평;재흡양조,흡양기간변화여대조조상사,출양상후5 d개시상승,병유지교고수평직지P21.저3개세포인자적단백수평변화균만우기기인수평변화,단변화추세기본상동.(2)성별화흡양도불능단독영향상술세포인자적표체(P＞0.05);일령가독입지영향타문적표체;흡양화일령량인소결합기래가현저영향타문적표체(P＜0.000 1).결론 인기ROP발병적근본원인시조산,흡양시기중요적외인;VEGF、FGF-2화ER삼여혈관적형성,재시망막혈관정상발육화ROP적발병궤제중기중요작용;VEGF직접수양농도조절,재음다세포인자중가능기관건성작용.
