CAJ | 학술논문

目的对人乳头瘤病毒11型全核苷酸序列的CpG基序(CpG motifs)进行分析,为阐明尖锐湿疣的发病机制和提高DNA疫苗的效能奠定理论基础.方法对从pBR322-HPV11重组质粒上酶切下来的HPV11全长DNA进行计算机分析,包括分类、计数和定位;并用限制性内切酶PCR法分析HPV11 DNA中CpG基序的甲基化状态,即分别用甲基化敏感的限制性内切酶AccⅡ、HaeⅡ和HpaⅡ对HPV11 DNA进行酶切消化,再以HpaⅡ切割位点侧翼序列为引物,以HpaⅡ酶切产物为模板,用聚合酶链反应(PCR)扩增HPV11 DNA片断,并用HPV11 DNA刺激表达有pCIneo-TLR9的HEK293细胞,ELISA法检测TNF-al-pha、IFN-alpha和IL-12的分泌.结果CpG的"C"的侧翼为两个嘌呤,"G"的侧翼为两个嘧啶,在HPV11中共14个.HPV11全基因组被AccⅡ切成2个片断、被HasⅡ切成3个片断、被HpaⅡ切成5个片断,而且以HpaⅡ酶切产物为模板进行PCR扩增,未能得到相应的片断.HPV-11 DNA刺激有人TLR9表达的HEK293细胞后能检测到TNF-alpha、IFN-alpha和IL-12的分泌.结论乳头瘤病毒11型DNA中含有GACGTT等非甲基化的CpG基序,而且具有免疫原性.
목적대인유두류병독11형전핵감산서렬적CpG기서(CpG motifs)진행분석,위천명첨예습우적발병궤제화제고DNA역묘적효능전정이론기출.방법대종pBR322-HPV11중조질립상매절하래적HPV11전장DNA진행계산궤분석,포괄분류、계수화정위;병용한제성내절매PCR법분석HPV11 DNA중CpG기서적갑기화상태,즉분별용갑기화민감적한제성내절매AccⅡ、HaeⅡ화HpaⅡ대HPV11 DNA진행매절소화,재이HpaⅡ절할위점측익서렬위인물,이HpaⅡ매절산물위모판,용취합매련반응(PCR)확증HPV11 DNA편단,병용HPV11 DNA자격표체유pCIneo-TLR9적HEK293세포,ELISA법검측TNF-al-pha、IFN-alpha화IL-12적분비.결과CpG적"C"적측익위량개표령,"G"적측익위량개밀정,재HPV11중공14개.HPV11전기인조피AccⅡ절성2개편단、피HasⅡ절성3개편단、피HpaⅡ절성5개편단,이차이HpaⅡ매절산물위모판진행PCR확증,미능득도상응적편단.HPV-11 DNA자격유인TLR9표체적HEK293세포후능검측도TNF-alpha、IFN-alpha화IL-12적분비.결론유두류병독11형DNA중함유GACGTT등비갑기화적CpG기서,이차구유면역원성.