东南大学学报(医学版)
東南大學學報(醫學版)
동남대학학보(의학판)
JOURNAL OF SOUTHEAST UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCE EDITION)
2009年
2期
126-130
,共5页
脂肪基质干细胞%分化%软骨%组织工程
脂肪基質榦細胞%分化%軟骨%組織工程
지방기질간세포%분화%연골%조직공정
目的:观察人脂肪基质干细胞(ADSCs)体外分离培养及成脂、成软骨诱导分化的生物学性状,探讨其作为软骨组织工程种子细胞的可行性.方法:(1)人脂肪组织来源于健康成年女性腹部吸脂术,酶消化法分离出ADSCs,体外培养扩增.(2)取第3代ADSCs,测细胞生长曲线,流式细胞仪测原代细胞表面标记;成脂和成软骨诱导分化.(3)倒置显微镜观察油红O、阿尔辛蓝(AB-PSA)染色和Ⅱ型胶原免疫细胞化学染色检测分化情况;RT-PCR检测相关标志基因表达.结果:(1)体外培养的ADSCs细胞形态均一,传代稳定.(2)经成脂诱导,细胞内出现空泡,油红O染色呈红色,RT-PCR检测到有Leptin、PPAR-γ表达;经成软骨诱导,AB-PSA染色呈紫红色,Ⅱ型胶原免疫细胞化学染色胞浆呈棕黄色,RT-PCR检测COLLⅡ、SOX9和aggrecan表达.结论:脂肪干细胞能向软骨细胞方向诱导分化,可作为软骨组织工程种子细胞.
目的:觀察人脂肪基質榦細胞(ADSCs)體外分離培養及成脂、成軟骨誘導分化的生物學性狀,探討其作為軟骨組織工程種子細胞的可行性.方法:(1)人脂肪組織來源于健康成年女性腹部吸脂術,酶消化法分離齣ADSCs,體外培養擴增.(2)取第3代ADSCs,測細胞生長麯線,流式細胞儀測原代細胞錶麵標記;成脂和成軟骨誘導分化.(3)倒置顯微鏡觀察油紅O、阿爾辛藍(AB-PSA)染色和Ⅱ型膠原免疫細胞化學染色檢測分化情況;RT-PCR檢測相關標誌基因錶達.結果:(1)體外培養的ADSCs細胞形態均一,傳代穩定.(2)經成脂誘導,細胞內齣現空泡,油紅O染色呈紅色,RT-PCR檢測到有Leptin、PPAR-γ錶達;經成軟骨誘導,AB-PSA染色呈紫紅色,Ⅱ型膠原免疫細胞化學染色胞漿呈棕黃色,RT-PCR檢測COLLⅡ、SOX9和aggrecan錶達.結論:脂肪榦細胞能嚮軟骨細胞方嚮誘導分化,可作為軟骨組織工程種子細胞.
목적:관찰인지방기질간세포(ADSCs)체외분리배양급성지、성연골유도분화적생물학성상,탐토기작위연골조직공정충자세포적가행성.방법:(1)인지방조직래원우건강성년녀성복부흡지술,매소화법분리출ADSCs,체외배양확증.(2)취제3대ADSCs,측세포생장곡선,류식세포의측원대세포표면표기;성지화성연골유도분화.(3)도치현미경관찰유홍O、아이신람(AB-PSA)염색화Ⅱ형효원면역세포화학염색검측분화정황;RT-PCR검측상관표지기인표체.결과:(1)체외배양적ADSCs세포형태균일,전대은정.(2)경성지유도,세포내출현공포,유홍O염색정홍색,RT-PCR검측도유Leptin、PPAR-γ표체;경성연골유도,AB-PSA염색정자홍색,Ⅱ형효원면역세포화학염색포장정종황색,RT-PCR검측COLLⅡ、SOX9화aggrecan표체.결론:지방간세포능향연골세포방향유도분화,가작위연골조직공정충자세포.