扬州大学学报（农业与生命科学版）
颺州大學學報（農業與生命科學版）
양주대학학보（농업여생명과학판）
JOURNAL OF YANGZHOU UNIVERSITY(AGRICULTURAL AND LIFE SCIENCE EDITION)
2009年
1期
13-17
,共5页
孙文瑶%许金俊%陶建平%吴海清%李金贵%彭昊%张艳%姜慧婕
孫文瑤%許金俊%陶建平%吳海清%李金貴%彭昊%張豔%薑慧婕
손문요%허금준%도건평%오해청%리금귀%팽호%장염%강혜첩
巨型艾美球虫%免疫原性相异株%消减文库%构建
巨型艾美毬蟲%免疫原性相異株%消減文庫%構建
거형애미구충%면역원성상이주%소감문고%구건
为分离鉴定巨型艾美球虫上海株与南通株间免疫原性的差异表达基因,分别以巨型艾美球虫上海株孢子囊cDNA为驱动组,以南通株孢子囊cDNA为试验组,或相反,利用抑制消减杂交(SSH)方法,通过2轮杂交和2次PCR分别构建了2个抑制性消减文库.随机从2个消减文库中分别挑取96个克隆产物,经PCR鉴定上海株和南通株孢子囊消减文库的重组率分别为91%和94%,差异基因片段大小为250～1 000 bp.从每个文库中随机挑取30个阳性克隆测序,并进行同源性比较分析,结果表明:从上海株cDNA消减文库中获得了19个单一有效序列,其中15个为未知序列;从南通株cDNA消减文库中获得了16个单一有效序列,其中13个为未知序列.这些结果将为分离巨型艾美球虫新功能基因和进一步探索球虫抗原变异相关的分子机理奠定基础.
為分離鑒定巨型艾美毬蟲上海株與南通株間免疫原性的差異錶達基因,分彆以巨型艾美毬蟲上海株孢子囊cDNA為驅動組,以南通株孢子囊cDNA為試驗組,或相反,利用抑製消減雜交(SSH)方法,通過2輪雜交和2次PCR分彆構建瞭2箇抑製性消減文庫.隨機從2箇消減文庫中分彆挑取96箇剋隆產物,經PCR鑒定上海株和南通株孢子囊消減文庫的重組率分彆為91%和94%,差異基因片段大小為250～1 000 bp.從每箇文庫中隨機挑取30箇暘性剋隆測序,併進行同源性比較分析,結果錶明:從上海株cDNA消減文庫中穫得瞭19箇單一有效序列,其中15箇為未知序列;從南通株cDNA消減文庫中穫得瞭16箇單一有效序列,其中13箇為未知序列.這些結果將為分離巨型艾美毬蟲新功能基因和進一步探索毬蟲抗原變異相關的分子機理奠定基礎.
위분리감정거형애미구충상해주여남통주간면역원성적차이표체기인,분별이거형애미구충상해주포자낭cDNA위구동조,이남통주포자낭cDNA위시험조,혹상반,이용억제소감잡교(SSH)방법,통과2륜잡교화2차PCR분별구건료2개억제성소감문고.수궤종2개소감문고중분별도취96개극륭산물,경PCR감정상해주화남통주포자낭소감문고적중조솔분별위91%화94%,차이기인편단대소위250～1 000 bp.종매개문고중수궤도취30개양성극륭측서,병진행동원성비교분석,결과표명:종상해주cDNA소감문고중획득료19개단일유효서렬,기중15개위미지서렬;종남통주cDNA소감문고중획득료16개단일유효서렬,기중13개위미지서렬.저사결과장위분리거형애미구충신공능기인화진일보탐색구충항원변이상관적분자궤리전정기출.
