家蚕小热休克蛋白基因BmHSP20.8的表达及功能研究
가잠소열휴극단백기인BmHSP20.8적표체급공능연구
Expression and Functional Research of BmHSP20.8 Gene From Silkworm, Bombyx mori
  • 万方数据
    蚕业科学 잠업과학
    ACTA SERICOLOGICA SINICA
    2009年 3期 516-522 ,共7页

    赵恩伟%吕正兵%盛清%陈健%聂作明%王丹%沈红丹%刘立丽%舒建洪%陈剑清%吴祥甫%张耀洲

    조은위%려정병%성청%진건%섭작명%왕단%침홍단%류립려%서건홍%진검청%오상보%장요주

    家蚕小热休克蛋白20.8%多克隆抗体制备%亚细胞定位%功能 傢蠶小熱休剋蛋白20.8%多剋隆抗體製備%亞細胞定位%功能
    가잠소열휴극단백20.8%다극륭항체제비%아세포정위%공능
    小热休克蛋白(small heat shock protein, sHSP)是一类受热处理后诱导产生的蛋白家族.从构建的家蚕蛹cDNA文库中获得了一条全长764 bp的基因序列(GenBank登录号:AAG30944.1),其开放阅读框(ORF)长561 bp,编码186个氨基酸.用生物信息学方法对此序列进行同源性分析,表明该序列是一条保守性高达85%的家蚕小热休克蛋白20.8(BmHSP20.8),无跨膜结构,主要分布于细胞质.将该序列的ORF与pET-28a(+)载体连接构建重组质粒,并转化到大肠杆菌BL21进行原核表达,纯化后的融合蛋白免疫新西兰大白兔获得抗血清.通过亚细胞定位技术研究BmHSP20.8在正常和热激状态下的家蚕卵巢上皮细胞Bm5和BmN中的变化,结果显示热激后BmHSP20.8蛋白从细胞质往细胞膜方向迁移.有BmHSP20.8表达的大肠杆菌菌株经48 ℃处理后,其生存率比未表达BmHSP20.8蛋白的菌株高4倍左右,说明BmHSP20.8蛋白在大肠杆菌中表达能够提高细菌体在高温环境下的生存率.
    소열휴극단백(small heat shock protein, sHSP)시일류수열처리후유도산생적단백가족.종구건적가잠용cDNA문고중획득료일조전장764 bp적기인서렬(GenBank등록호:AAG30944.1),기개방열독광(ORF)장561 bp,편마186개안기산.용생물신식학방법대차서렬진행동원성분석,표명해서렬시일조보수성고체85%적가잠소열휴극단백20.8(BmHSP20.8),무과막결구,주요분포우세포질.장해서렬적ORF여pET-28a(+)재체련접구건중조질립,병전화도대장간균BL21진행원핵표체,순화후적융합단백면역신서란대백토획득항혈청.통과아세포정위기술연구BmHSP20.8재정상화열격상태하적가잠란소상피세포Bm5화BmN중적변화,결과현시열격후BmHSP20.8단백종세포질왕세포막방향천이.유BmHSP20.8표체적대장간균균주경48 ℃처리후,기생존솔비미표체BmHSP20.8단백적균주고4배좌우,설명BmHSP20.8단백재대장간균중표체능구제고세균체재고온배경하적생존솔.
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