细胞与分子免疫学杂志
細胞與分子免疫學雜誌
세포여분자면역학잡지
2005年
2期
188-190
,共3页
蔡家利%宫爱艳%王健%吴胜昔%魏光河
蔡傢利%宮愛豔%王健%吳勝昔%魏光河
채가리%궁애염%왕건%오성석%위광하
AIV%Fab%噬菌体抗体库%家禽
AIV%Fab%噬菌體抗體庫%傢禽
AIV%Fab%서균체항체고%가금
目的: 构建抗禽流感病毒(AIV)抗体Fab轻链库,以便进一步构建完整AIV噬菌体抗体库.方法: 采用RT-PCR技术, 从经禽流感灭活油乳剂疫苗免疫的罗曼蛋鸡的外周血淋巴细胞中扩增抗AIV抗体轻链基因, 将扩增的抗体轻链基因与载体PComb3HSS连接后, 电转化入大肠杆菌XLI-Blue, 克隆筛选重组抗体Fab轻链基因的质粒, 并进行酶切鉴定和序列分析.结果: 扩增的AIV抗体轻链基因片段的大小约为617 bp. 经克隆筛选鉴定和序列分析证明, 获得抗AIV抗体轻链库, 该轻链库库容量为2.5×106, 轻链基因的重组率为50%.结论: 构建了库容量为2.5×106的抗AIV抗体轻链基因库, 为下一步构建鸡抗AIV噬菌体抗体库和筛选特异性的AIV Fab抗体奠定基础.
目的: 構建抗禽流感病毒(AIV)抗體Fab輕鏈庫,以便進一步構建完整AIV噬菌體抗體庫.方法: 採用RT-PCR技術, 從經禽流感滅活油乳劑疫苗免疫的囉曼蛋鷄的外週血淋巴細胞中擴增抗AIV抗體輕鏈基因, 將擴增的抗體輕鏈基因與載體PComb3HSS連接後, 電轉化入大腸桿菌XLI-Blue, 剋隆篩選重組抗體Fab輕鏈基因的質粒, 併進行酶切鑒定和序列分析.結果: 擴增的AIV抗體輕鏈基因片段的大小約為617 bp. 經剋隆篩選鑒定和序列分析證明, 穫得抗AIV抗體輕鏈庫, 該輕鏈庫庫容量為2.5×106, 輕鏈基因的重組率為50%.結論: 構建瞭庫容量為2.5×106的抗AIV抗體輕鏈基因庫, 為下一步構建鷄抗AIV噬菌體抗體庫和篩選特異性的AIV Fab抗體奠定基礎.
목적: 구건항금류감병독(AIV)항체Fab경련고,이편진일보구건완정AIV서균체항체고.방법: 채용RT-PCR기술, 종경금류감멸활유유제역묘면역적라만단계적외주혈림파세포중확증항AIV항체경련기인, 장확증적항체경련기인여재체PComb3HSS련접후, 전전화입대장간균XLI-Blue, 극륭사선중조항체Fab경련기인적질립, 병진행매절감정화서렬분석.결과: 확증적AIV항체경련기인편단적대소약위617 bp. 경극륭사선감정화서렬분석증명, 획득항AIV항체경련고, 해경련고고용량위2.5×106, 경련기인적중조솔위50%.결론: 구건료고용량위2.5×106적항AIV항체경련기인고, 위하일보구건계항AIV서균체항체고화사선특이성적AIV Fab항체전정기출.
