第四军医大学学报
第四軍醫大學學報
제사군의대학학보
JOURNAL OF THE FOURTH MILITARY MEDICAL UNIVERSITY
2005年
3期
199-201
,共3页
姜南艳%于文彬%苏明权%李斌%郝晓柯%李立文
薑南豔%于文彬%囌明權%李斌%郝曉柯%李立文
강남염%우문빈%소명권%리빈%학효가%리립문
高迁移率族蛋白1%试剂盒,诊断%基因表达
高遷移率族蛋白1%試劑盒,診斷%基因錶達
고천이솔족단백1%시제합,진단%기인표체
目的:克隆小鼠高迁移率族蛋白1(high mobility group box 1,HMGB1)B盒编码序列并在大肠杆菌中表达GST-B盒融合蛋白. 方法:从新生小鼠肺组织提取总RNA,经RT-PCR获得HMGB1 B盒编码序列. 将酶切后PCR产物克隆到pGEX-4T-2载体的BamHI和EcoRI位点之间,经双酶切鉴定后测序证实. 用pGEX-4T-2-B转化BL21(DE3)感受态细胞,在30℃经IPTG诱导表达5 h后进行SDS-PAGE分析. 结果:测序结果证实成功获得了小鼠HMGB1 B盒编码序列,其序列与GenBank中报道序列完全一致. SDS-PAGE分析表明,在大肠杆菌BL21(DE3)中高效表达了GST-B盒蛋白,表达量约占菌体总蛋白的30%,结论:成功克隆小鼠HMGB1 B盒编码序列并在大肠杆菌中获得了高效表达.
目的:剋隆小鼠高遷移率族蛋白1(high mobility group box 1,HMGB1)B盒編碼序列併在大腸桿菌中錶達GST-B盒融閤蛋白. 方法:從新生小鼠肺組織提取總RNA,經RT-PCR穫得HMGB1 B盒編碼序列. 將酶切後PCR產物剋隆到pGEX-4T-2載體的BamHI和EcoRI位點之間,經雙酶切鑒定後測序證實. 用pGEX-4T-2-B轉化BL21(DE3)感受態細胞,在30℃經IPTG誘導錶達5 h後進行SDS-PAGE分析. 結果:測序結果證實成功穫得瞭小鼠HMGB1 B盒編碼序列,其序列與GenBank中報道序列完全一緻. SDS-PAGE分析錶明,在大腸桿菌BL21(DE3)中高效錶達瞭GST-B盒蛋白,錶達量約佔菌體總蛋白的30%,結論:成功剋隆小鼠HMGB1 B盒編碼序列併在大腸桿菌中穫得瞭高效錶達.
목적:극륭소서고천이솔족단백1(high mobility group box 1,HMGB1)B합편마서렬병재대장간균중표체GST-B합융합단백. 방법:종신생소서폐조직제취총RNA,경RT-PCR획득HMGB1 B합편마서렬. 장매절후PCR산물극륭도pGEX-4T-2재체적BamHI화EcoRI위점지간,경쌍매절감정후측서증실. 용pGEX-4T-2-B전화BL21(DE3)감수태세포,재30℃경IPTG유도표체5 h후진행SDS-PAGE분석. 결과:측서결과증실성공획득료소서HMGB1 B합편마서렬,기서렬여GenBank중보도서렬완전일치. SDS-PAGE분석표명,재대장간균BL21(DE3)중고효표체료GST-B합단백,표체량약점균체총단백적30%,결론:성공극륭소서HMGB1 B합편마서렬병재대장간균중획득료고효표체.
