上海交通大学学报（医学版）
上海交通大學學報（醫學版）
상해교통대학학보（의학판）
JOURNAL OF SHANGHAI JIAOTONG UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCE)
2010年
7期
807-811
,共5页
人皮肤成纤维细胞%衰老%胶原%基质金属蛋白酶%中波紫外线
人皮膚成纖維細胞%衰老%膠原%基質金屬蛋白酶%中波紫外線
인피부성섬유세포%쇠로%효원%기질금속단백매%중파자외선
目的 探讨中波紫外线(UVB)对人皮肤成纤维细胞的诱导衰老作用及可能机制.方法 使用组织块法分离培养原代人皮肤成纤维细胞,通过观察不同剂量UVB照射后的细胞形态学改变以及β-半乳糖苷酶(p-gal)细胞衰老染色情况,确定后续实验诱导皮肤成纤维细胞衰老的UVB单次照射剂量.于经确定剂量UVB照射后的不同时点(12、24、48、72 h)收集细胞及其细胞培养上清液,Western blotting检测诱导衰老的皮肤成纤维细胞衰老相关蛋白P16表达;ELISA法检测诱导衰老细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原及基质金属蛋白酶1、3(MMP1、MMP3)表达.结果 经40 mJ/cm2 UVB单次照射的人皮肤成纤维细胞呈现典型的衰老细胞形态学改变,β-gal细胞衰老染色阳性细胞百分比为(88.75±5.32)%,确定诱导衰老UVB单次照射剂量为40 mJ/cm2.Western blotting显示,诱导衰老皮肤成纤维细胞P16蛋白表达随UVB照射时间的延长而明显升高;ELISA法检测发现诱导衰老细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原表达随UVB照射时间的延长而明显减少,MMP1和MMP3表达则随UVB照射时间的延长而显著增加.结论 UVB照射能诱导人皮肤成纤维细胞发生衰老,其机制可能与细胞胶原合成减少而降解增加有关.
目的 探討中波紫外線(UVB)對人皮膚成纖維細胞的誘導衰老作用及可能機製.方法 使用組織塊法分離培養原代人皮膚成纖維細胞,通過觀察不同劑量UVB照射後的細胞形態學改變以及β-半乳糖苷酶(p-gal)細胞衰老染色情況,確定後續實驗誘導皮膚成纖維細胞衰老的UVB單次照射劑量.于經確定劑量UVB照射後的不同時點(12、24、48、72 h)收集細胞及其細胞培養上清液,Western blotting檢測誘導衰老的皮膚成纖維細胞衰老相關蛋白P16錶達;ELISA法檢測誘導衰老細胞Ⅰ、Ⅲ型膠原及基質金屬蛋白酶1、3(MMP1、MMP3)錶達.結果 經40 mJ/cm2 UVB單次照射的人皮膚成纖維細胞呈現典型的衰老細胞形態學改變,β-gal細胞衰老染色暘性細胞百分比為(88.75±5.32)%,確定誘導衰老UVB單次照射劑量為40 mJ/cm2.Western blotting顯示,誘導衰老皮膚成纖維細胞P16蛋白錶達隨UVB照射時間的延長而明顯升高;ELISA法檢測髮現誘導衰老細胞Ⅰ、Ⅲ型膠原錶達隨UVB照射時間的延長而明顯減少,MMP1和MMP3錶達則隨UVB照射時間的延長而顯著增加.結論 UVB照射能誘導人皮膚成纖維細胞髮生衰老,其機製可能與細胞膠原閤成減少而降解增加有關.
목적 탐토중파자외선(UVB)대인피부성섬유세포적유도쇠로작용급가능궤제.방법 사용조직괴법분리배양원대인피부성섬유세포,통과관찰불동제량UVB조사후적세포형태학개변이급β-반유당감매(p-gal)세포쇠로염색정황,학정후속실험유도피부성섬유세포쇠로적UVB단차조사제량.우경학정제량UVB조사후적불동시점(12、24、48、72 h)수집세포급기세포배양상청액,Western blotting검측유도쇠로적피부성섬유세포쇠로상관단백P16표체;ELISA법검측유도쇠로세포Ⅰ、Ⅲ형효원급기질금속단백매1、3(MMP1、MMP3)표체.결과 경40 mJ/cm2 UVB단차조사적인피부성섬유세포정현전형적쇠로세포형태학개변,β-gal세포쇠로염색양성세포백분비위(88.75±5.32)%,학정유도쇠로UVB단차조사제량위40 mJ/cm2.Western blotting현시,유도쇠로피부성섬유세포P16단백표체수UVB조사시간적연장이명현승고;ELISA법검측발현유도쇠로세포Ⅰ、Ⅲ형효원표체수UVB조사시간적연장이명현감소,MMP1화MMP3표체칙수UVB조사시간적연장이현저증가.결론 UVB조사능유도인피부성섬유세포발생쇠로,기궤제가능여세포효원합성감소이강해증가유관.
