上海师范大学学报(自然科学版)
上海師範大學學報(自然科學版)
상해사범대학학보(자연과학판)
JOURNAL OF SHANGHAI TEACHERS UNIVERSITY(NATURAL SCIENCES)
2010年
4期
415-420
,共6页
朱旭国%许甜甜%杜宁%李焱%卢轶%陈军
硃旭國%許甜甜%杜寧%李焱%盧軼%陳軍
주욱국%허첨첨%두저%리염%로질%진군
氯过氧化物酶%共沉淀%双水相系统%提取纯化
氯過氧化物酶%共沉澱%雙水相繫統%提取純化
록과양화물매%공침정%쌍수상계통%제취순화
来源于海洋真菌Caldariomyces fumago的氯过氧化物酶是一种用途广泛的氧化酶,由于它在生物合成过程中浓度积累低、活力稳定性差,高纯度酶提纯过程回收率低,价格昂贵等原因限制了氯过氧化物酶的应用.利用亲水聚合物PEG 6000在高离子强度下失水沉淀夹带酶蛋白特点,结合PEG/(NH4)2SO4双水相萃取得到高浓度酶蛋白,再经Sephadex G-75柱层析纯化可得到高纯度酶样品.结果显示:60%饱和度的(NH4)2SO4溶液可使PEG 6000夹带沉淀出总酶活力95%的氯过氧化物酶,酶在PEG/(NH4)2SO4双水相系统中上下相分配率k可以达到0.228以下,回收率达到65.2%,纯度提高了7.4倍,柱层析后酶纯度只略有提高,总回收率稍有下降.研究结果为低浓度生物活性物质的高效率提取提供了新的途径.
來源于海洋真菌Caldariomyces fumago的氯過氧化物酶是一種用途廣汎的氧化酶,由于它在生物閤成過程中濃度積纍低、活力穩定性差,高純度酶提純過程迴收率低,價格昂貴等原因限製瞭氯過氧化物酶的應用.利用親水聚閤物PEG 6000在高離子彊度下失水沉澱夾帶酶蛋白特點,結閤PEG/(NH4)2SO4雙水相萃取得到高濃度酶蛋白,再經Sephadex G-75柱層析純化可得到高純度酶樣品.結果顯示:60%飽和度的(NH4)2SO4溶液可使PEG 6000夾帶沉澱齣總酶活力95%的氯過氧化物酶,酶在PEG/(NH4)2SO4雙水相繫統中上下相分配率k可以達到0.228以下,迴收率達到65.2%,純度提高瞭7.4倍,柱層析後酶純度隻略有提高,總迴收率稍有下降.研究結果為低濃度生物活性物質的高效率提取提供瞭新的途徑.
래원우해양진균Caldariomyces fumago적록과양화물매시일충용도엄범적양화매,유우타재생물합성과정중농도적루저、활력은정성차,고순도매제순과정회수솔저,개격앙귀등원인한제료록과양화물매적응용.이용친수취합물PEG 6000재고리자강도하실수침정협대매단백특점,결합PEG/(NH4)2SO4쌍수상췌취득도고농도매단백,재경Sephadex G-75주층석순화가득도고순도매양품.결과현시:60%포화도적(NH4)2SO4용액가사PEG 6000협대침정출총매활력95%적록과양화물매,매재PEG/(NH4)2SO4쌍수상계통중상하상분배솔k가이체도0.228이하,회수솔체도65.2%,순도제고료7.4배,주층석후매순도지략유제고,총회수솔초유하강.연구결과위저농도생물활성물질적고효솔제취제공료신적도경.
