蚌埠医学院学报
蚌埠醫學院學報
방부의학원학보
ACTA ACADEMIAE MEDICINAE BENGBU
2011年
12期
1388-1390
,共3页
耐甲氧西林基因金黄色葡萄球菌%双重实时荧光PCR%快速检测
耐甲氧西林基因金黃色葡萄毬菌%雙重實時熒光PCR%快速檢測
내갑양서림기인금황색포도구균%쌍중실시형광PCR%쾌속검측
目的:建立一种能快速检测金黄色葡萄球菌,同时能快速鉴别是否具有耐甲氧西林基因的双重实时荧光PCR方法.方法:以金黄色葡萄球菌特异NUC基因的保守区为靶区域设计特异引物和TaqMan荧光探针,同时针对耐甲氧西林特异MecA基因设计另一对引物和探针;2条探针的5′端标记不同荧光报告基团(FAM和HEX),3′端标记荧光淬灭基团,建立双重实时荧光PCR方法,检测样本中的金黄色葡萄球菌以及鉴别其是否具有耐甲氧西林基因,并对双重实时荧光PCR方法的的特异性和灵敏度进行评价.结果:双重荧光PCR方法可对金黄色葡萄球菌及耐甲氧西林基因分别进行特异扩增,两者均为阳性时可判为耐甲氧西林金黄色葡萄球菌;金黄色葡萄球菌特异基因特异扩增阳性而耐甲氧西林基因特异扩增阴性可判为甲氧西林敏感的金黄色葡萄球菌;对同种属的表皮葡萄球菌、粪链球菌、藤黄微球菌等病原体均无扩增;双重实时荧光PCR方法的灵敏度最低可检测至100个菌体.结论:建立的实时荧光PCR检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的方法不仅能实现对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌社区感染和临床感染的监控,同时也可为临床上耐甲氧西林葡萄球菌感染患者的用药提供必要的依据.
目的:建立一種能快速檢測金黃色葡萄毬菌,同時能快速鑒彆是否具有耐甲氧西林基因的雙重實時熒光PCR方法.方法:以金黃色葡萄毬菌特異NUC基因的保守區為靶區域設計特異引物和TaqMan熒光探針,同時針對耐甲氧西林特異MecA基因設計另一對引物和探針;2條探針的5′耑標記不同熒光報告基糰(FAM和HEX),3′耑標記熒光淬滅基糰,建立雙重實時熒光PCR方法,檢測樣本中的金黃色葡萄毬菌以及鑒彆其是否具有耐甲氧西林基因,併對雙重實時熒光PCR方法的的特異性和靈敏度進行評價.結果:雙重熒光PCR方法可對金黃色葡萄毬菌及耐甲氧西林基因分彆進行特異擴增,兩者均為暘性時可判為耐甲氧西林金黃色葡萄毬菌;金黃色葡萄毬菌特異基因特異擴增暘性而耐甲氧西林基因特異擴增陰性可判為甲氧西林敏感的金黃色葡萄毬菌;對同種屬的錶皮葡萄毬菌、糞鏈毬菌、籐黃微毬菌等病原體均無擴增;雙重實時熒光PCR方法的靈敏度最低可檢測至100箇菌體.結論:建立的實時熒光PCR檢測耐甲氧西林金黃色葡萄毬菌的方法不僅能實現對耐甲氧西林金黃色葡萄毬菌社區感染和臨床感染的鑑控,同時也可為臨床上耐甲氧西林葡萄毬菌感染患者的用藥提供必要的依據.
목적:건립일충능쾌속검측금황색포도구균,동시능쾌속감별시부구유내갑양서림기인적쌍중실시형광PCR방법.방법:이금황색포도구균특이NUC기인적보수구위파구역설계특이인물화TaqMan형광탐침,동시침대내갑양서림특이MecA기인설계령일대인물화탐침;2조탐침적5′단표기불동형광보고기단(FAM화HEX),3′단표기형광쉬멸기단,건립쌍중실시형광PCR방법,검측양본중적금황색포도구균이급감별기시부구유내갑양서림기인,병대쌍중실시형광PCR방법적적특이성화령민도진행평개.결과:쌍중형광PCR방법가대금황색포도구균급내갑양서림기인분별진행특이확증,량자균위양성시가판위내갑양서림금황색포도구균;금황색포도구균특이기인특이확증양성이내갑양서림기인특이확증음성가판위갑양서림민감적금황색포도구균;대동충속적표피포도구균、분련구균、등황미구균등병원체균무확증;쌍중실시형광PCR방법적령민도최저가검측지100개균체.결론:건립적실시형광PCR검측내갑양서림금황색포도구균적방법불부능실현대내갑양서림금황색포도구균사구감염화림상감염적감공,동시야가위림상상내갑양서림포도구균감염환자적용약제공필요적의거.
