临床肿瘤学杂志
臨床腫瘤學雜誌
림상종류학잡지
CHINESE CLINICAL ONCOLOGY
2011年
11期
970-973
,共4页
白玉贤%刘磊%隋红%魏孝礼%苑珩珩
白玉賢%劉磊%隋紅%魏孝禮%苑珩珩
백옥현%류뢰%수홍%위효례%원형형
Pokemon基因%大肠癌%RNA干扰
Pokemon基因%大腸癌%RNA榦擾
Pokemon기인%대장암%RNA간우
目的 探索miRNA干扰Pokemon基因后对大肠癌细胞系LoVo增殖和细胞周期的作用.方法 构建靶向Pokemon基因的miRNA重组质粒并转染LoVo细胞,设重组质粒组、阴性对照质粒组和脂质体空白对照组,运用实时荧光定量PCR(QPCR)检测干扰后LoVo细胞中Pokemon mRNA的表达,MTT法和流式细胞仪技术分析转染后细胞的增殖和周期变化.结果 成功构建含miRNA片段的重组质粒,依次命名为mR22-1、mR22-2、mR22-3和mR22-4；分别转染LoVo细胞后,PokemonmRNA表达水平明显下调,以mR22-1最强,干扰效率为50％.MTT检测显示,mR22-1可明显抑制细胞增殖,24、48和72h的抑制率分别为(23±2.1)％、(47±3.0)％和(69±2.5)％,呈时间依赖性；流式细胞仪测定转染后LoVo细胞周期阻滞在G1期.结论 采用RNAi技术可以特异性阻断Pokemon基因的表达；Pokemon基因有促进大肠癌细胞株LoVo增殖的作用.
目的 探索miRNA榦擾Pokemon基因後對大腸癌細胞繫LoVo增殖和細胞週期的作用.方法 構建靶嚮Pokemon基因的miRNA重組質粒併轉染LoVo細胞,設重組質粒組、陰性對照質粒組和脂質體空白對照組,運用實時熒光定量PCR(QPCR)檢測榦擾後LoVo細胞中Pokemon mRNA的錶達,MTT法和流式細胞儀技術分析轉染後細胞的增殖和週期變化.結果 成功構建含miRNA片段的重組質粒,依次命名為mR22-1、mR22-2、mR22-3和mR22-4；分彆轉染LoVo細胞後,PokemonmRNA錶達水平明顯下調,以mR22-1最彊,榦擾效率為50％.MTT檢測顯示,mR22-1可明顯抑製細胞增殖,24、48和72h的抑製率分彆為(23±2.1)％、(47±3.0)％和(69±2.5)％,呈時間依賴性；流式細胞儀測定轉染後LoVo細胞週期阻滯在G1期.結論 採用RNAi技術可以特異性阻斷Pokemon基因的錶達；Pokemon基因有促進大腸癌細胞株LoVo增殖的作用.
목적 탐색miRNA간우Pokemon기인후대대장암세포계LoVo증식화세포주기적작용.방법 구건파향Pokemon기인적miRNA중조질립병전염LoVo세포,설중조질립조、음성대조질립조화지질체공백대조조,운용실시형광정량PCR(QPCR)검측간우후LoVo세포중Pokemon mRNA적표체,MTT법화류식세포의기술분석전염후세포적증식화주기변화.결과 성공구건함miRNA편단적중조질립,의차명명위mR22-1、mR22-2、mR22-3화mR22-4；분별전염LoVo세포후,PokemonmRNA표체수평명현하조,이mR22-1최강,간우효솔위50％.MTT검측현시,mR22-1가명현억제세포증식,24、48화72h적억제솔분별위(23±2.1)％、(47±3.0)％화(69±2.5)％,정시간의뢰성；류식세포의측정전염후LoVo세포주기조체재G1기.결론 채용RNAi기술가이특이성조단Pokemon기인적표체；Pokemon기인유촉진대장암세포주LoVo증식적작용.
