中国水产科学
中國水產科學
중국수산과학
Journal of Fishery Sciences of China
2011年
6期
1377-1383
,共7页
牙鲆%皮肤黏液抗体%免疫球蛋白%温度%淋巴囊肿病毒
牙鲆%皮膚黏液抗體%免疫毬蛋白%溫度%淋巴囊腫病毒
아평%피부점액항체%면역구단백%온도%림파낭종병독
在9℃、15℃、21℃和26℃4种不同水温下,用淋巴囊肿病毒(LCDV)灭活疫苗腹腔注射牙鲆,应用间接酶联免疫吸附试验(ELISA)研究了其皮肤黏液中特异性抗体水平的变化,以分析温度对牙鲆皮肤黏液抗体产生的影响.ELISA结果表明,9℃和15℃水温下牙鲆黏液OD值分别在注射LCDV后第9周和第7周达到峰值(9℃:OD=0.179; 15℃:OD=0.233); 21℃水温下OD值上升最快,5周达到峰值(0.316); 26℃水温下OD值较21℃无显著差异,也于5周达到峰值(0.295).采用硫酸铵分步盐析等技术粗提不同温度下OD值最高时的牙鲆皮肤黏液中的免疫球蛋白(Ig),SDS-PAGE检测发现,各温度组黏液蛋白中均含有72 kD和26 kD蛋白条带.Western blotting结果显示,抗牙鲆血清Ig重链的单克隆抗体只与黏液蛋白中72 kD条带发生反应,确定为牙鲆皮肤黏液Ig重链.综上结果表明,牙鲆在最适生活温度(21℃)下,抗体应答强度最大.牙鲆粗提黏液蛋白中Ig的初步确定,为探索牙鲆黏液免疫机制提供了材料.
在9℃、15℃、21℃和26℃4種不同水溫下,用淋巴囊腫病毒(LCDV)滅活疫苗腹腔註射牙鲆,應用間接酶聯免疫吸附試驗(ELISA)研究瞭其皮膚黏液中特異性抗體水平的變化,以分析溫度對牙鲆皮膚黏液抗體產生的影響.ELISA結果錶明,9℃和15℃水溫下牙鲆黏液OD值分彆在註射LCDV後第9週和第7週達到峰值(9℃:OD=0.179; 15℃:OD=0.233); 21℃水溫下OD值上升最快,5週達到峰值(0.316); 26℃水溫下OD值較21℃無顯著差異,也于5週達到峰值(0.295).採用硫痠銨分步鹽析等技術粗提不同溫度下OD值最高時的牙鲆皮膚黏液中的免疫毬蛋白(Ig),SDS-PAGE檢測髮現,各溫度組黏液蛋白中均含有72 kD和26 kD蛋白條帶.Western blotting結果顯示,抗牙鲆血清Ig重鏈的單剋隆抗體隻與黏液蛋白中72 kD條帶髮生反應,確定為牙鲆皮膚黏液Ig重鏈.綜上結果錶明,牙鲆在最適生活溫度(21℃)下,抗體應答彊度最大.牙鲆粗提黏液蛋白中Ig的初步確定,為探索牙鲆黏液免疫機製提供瞭材料.
재9℃、15℃、21℃화26℃4충불동수온하,용림파낭종병독(LCDV)멸활역묘복강주사아평,응용간접매련면역흡부시험(ELISA)연구료기피부점액중특이성항체수평적변화,이분석온도대아평피부점액항체산생적영향.ELISA결과표명,9℃화15℃수온하아평점액OD치분별재주사LCDV후제9주화제7주체도봉치(9℃:OD=0.179; 15℃:OD=0.233); 21℃수온하OD치상승최쾌,5주체도봉치(0.316); 26℃수온하OD치교21℃무현저차이,야우5주체도봉치(0.295).채용류산안분보염석등기술조제불동온도하OD치최고시적아평피부점액중적면역구단백(Ig),SDS-PAGE검측발현,각온도조점액단백중균함유72 kD화26 kD단백조대.Western blotting결과현시,항아평혈청Ig중련적단극륭항체지여점액단백중72 kD조대발생반응,학정위아평피부점액Ig중련.종상결과표명,아평재최괄생활온도(21℃)하,항체응답강도최대.아평조제점액단백중Ig적초보학정,위탐색아평점액면역궤제제공료재료.
