CAJ | 학술논문

本文通过牛肝线粒体细胞色素Tb5和它的F35Y突变体蛋白相对分子质量的外标法测定,得到细胞色素Tb5全蛋白的相对分子质量为10 077.5;脱辅基蛋白的相对分子质量为9461.4.F35Y突变体全蛋白的相对分子质量为10093.6,它的脱辅基蛋白的相对分子质量为9477.5.不同nozzle电压下的电喷雾质谱结果表明,该电压的大小明显影响蛋白肽链与血红素辅基之间的非共价结合.随着电压的降低,全蛋白质谱峰的强度逐渐增大.然而,过低的电压导致了Na+,K+离子加合峰相对强度的增加,而不利于谱图分析.同时,考虑到细胞色素Tb5在甲醇溶液和酸性溶液中的变性行为,因此选择nozzle电压70V,10%的甲醇水溶液和pH=7为得到全蛋白质谱峰的最佳条件.相同实验条件下得到的野生型Cyt Tb5和F35Y突变体全蛋白的质谱峰相比较,其相对丰度有悬殊的差异,表明F35Y突变体蛋白的血红素结合能力明显低于野生型蛋白.通过对解离出的Heme b的分子离子峰进行解析,证明铁仍以三价离子存在于血红素辅基中.
본문통과우간선립체세포색소Tb5화타적F35Y돌변체단백상대분자질량적외표법측정,득도세포색소Tb5전단백적상대분자질량위10 077.5;탈보기단백적상대분자질량위9461.4.F35Y돌변체전단백적상대분자질량위10093.6,타적탈보기단백적상대분자질량위9477.5.불동nozzle전압하적전분무질보결과표명,해전압적대소명현영향단백태련여혈홍소보기지간적비공개결합.수착전압적강저,전단백질보봉적강도축점증대.연이,과저적전압도치료Na+,K+리자가합봉상대강도적증가,이불리우보도분석.동시,고필도세포색소Tb5재갑순용액화산성용액중적변성행위,인차선택nozzle전압70V,10%적갑순수용액화pH=7위득도전단백질보봉적최가조건.상동실험조건하득도적야생형Cyt Tb5화F35Y돌변체전단백적질보봉상비교,기상대봉도유현수적차이,표명F35Y돌변체단백적혈홍소결합능력명현저우야생형단백.통과대해리출적Heme b적분자리자봉진행해석,증명철잉이삼개리자존재우혈홍소보기중.