生物化学与生物物理进展
生物化學與生物物理進展
생물화학여생물물리진전
PROGRESS IN BIOCHEMISTRY AND BIOPHYSICS
2000年
5期
524-528
,共5页
宋艳斌%伍志坚%尹芳%马文丽%杨光彩%伍柏松%徐钤
宋豔斌%伍誌堅%尹芳%馬文麗%楊光綵%伍柏鬆%徐鈐
송염빈%오지견%윤방%마문려%양광채%오백송%서검
CD基因%5-氟胞嘧啶%T淋巴细胞%逆转录病毒%基因治疗
CD基因%5-氟胞嘧啶%T淋巴細胞%逆轉錄病毒%基因治療
CD기인%5-불포밀정%T림파세포%역전록병독%기인치료
去除供者骨髓中的T淋巴细胞可有效防止移植物抗宿主病(GVHD)的发生.用含大肠杆菌胞嘧啶脱氨酶(EC-CD)基因的高滴度逆转录病毒(1.5×105 CFU/ml)感染小鼠T淋巴细胞,G418筛选,获得稳定表达CD基因的T/ pCD2细胞.经PCR和RT-PCR方法检测证明CD基因已成功地导入T淋巴细胞中并有效表达.分别用不同浓度的5-FCyt作用于T/ pCD2及T淋巴细胞,光镜下观察不同时间细胞数目变化及MTT法检测细胞活性.结果表明,5-FCyt浓度大于1 μmol/L时,即对T/ pCD2细胞有显著的杀伤作用,而对正常T淋巴细胞基本无毒性,且T/ pCD2细胞在加入药物后生存时间(3～5 d)明显短于未转染的T淋巴细胞(大于14 d).
去除供者骨髓中的T淋巴細胞可有效防止移植物抗宿主病(GVHD)的髮生.用含大腸桿菌胞嘧啶脫氨酶(EC-CD)基因的高滴度逆轉錄病毒(1.5×105 CFU/ml)感染小鼠T淋巴細胞,G418篩選,穫得穩定錶達CD基因的T/ pCD2細胞.經PCR和RT-PCR方法檢測證明CD基因已成功地導入T淋巴細胞中併有效錶達.分彆用不同濃度的5-FCyt作用于T/ pCD2及T淋巴細胞,光鏡下觀察不同時間細胞數目變化及MTT法檢測細胞活性.結果錶明,5-FCyt濃度大于1 μmol/L時,即對T/ pCD2細胞有顯著的殺傷作用,而對正常T淋巴細胞基本無毒性,且T/ pCD2細胞在加入藥物後生存時間(3～5 d)明顯短于未轉染的T淋巴細胞(大于14 d).
거제공자골수중적T림파세포가유효방지이식물항숙주병(GVHD)적발생.용함대장간균포밀정탈안매(EC-CD)기인적고적도역전록병독(1.5×105 CFU/ml)감염소서T림파세포,G418사선,획득은정표체CD기인적T/ pCD2세포.경PCR화RT-PCR방법검측증명CD기인이성공지도입T림파세포중병유효표체.분별용불동농도적5-FCyt작용우T/ pCD2급T림파세포,광경하관찰불동시간세포수목변화급MTT법검측세포활성.결과표명,5-FCyt농도대우1 μmol/L시,즉대T/ pCD2세포유현저적살상작용,이대정상T림파세포기본무독성,차T/ pCD2세포재가입약물후생존시간(3～5 d)명현단우미전염적T림파세포(대우14 d).
