昆明医学院学报
昆明醫學院學報
곤명의학원학보
ACADEMIC JOURNAL OF KUNMING MEDICAL COLLEGE
2003年
3期
16-21
,共6页
董坚%寸丽玲%王志光%曾卫玲%胡石秀
董堅%吋麗玲%王誌光%曾衛玲%鬍石秀
동견%촌려령%왕지광%증위령%호석수
IL-2%B7%逆转录病毒载体%小鼠胰腺癌细胞%抗肿瘤效应
IL-2%B7%逆轉錄病毒載體%小鼠胰腺癌細胞%抗腫瘤效應
IL-2%B7%역전록병독재체%소서이선암세포%항종류효응
目的:IL-2是一种具有抗肿瘤作用的细胞因子,B7是诱导细胞免疫的共刺激分子,联合在肿瘤细胞中表达IL-2或IL-2/B7,诱导机体抗肿瘤免疫应答,为IL-2基因治疗进入临床提供依据.方法:利用逆转录载体PLXSN构建了插入IL-2基因的重组逆转录病毒载体.将重组逆转录病毒载体引入包装细胞CRIP,测病毒滴毒为6×105CFU/mL,用成熟重组逆转录病毒转染小鼠胰腺癌细胞MPC-35,经G418筛选得抗性克隆MPC-351,PCR检测证实目的基因已整合在MPC-35细胞基因组中;引入携带B7基因的腺病毒载体转染MPC-351,经流式细胞仪证实B7基因已在MPC-351中获得表达,命名为MPC-352.结果:采用ELISA方法检测MPC-351、MPC-352分泌IL-2水平分别为95.5 U/mL及92.5 U/mL,与亲代MPC-35比较,MPC-351体外增长率及形态无明显变化;MPC-352无形态的改变,但增长速度减缓,流式细胞仪测试显示:MPC-35本身不表达MHC-class Ⅰ类分子,MPC-351有ICAM-1的表达增加,MPC-352有class Ⅱ和ICAM-Ⅰ的表达增加;小鼠体内移瘤实验表明:与作为对照的MPC-35细胞相比,MPC-351,MPC-352在小鼠体内的生长明显受抑制,出瘤时间晚(P＜0.05),瘤块小(P＜0.01),生命时间延长(P＜0.01).
目的:IL-2是一種具有抗腫瘤作用的細胞因子,B7是誘導細胞免疫的共刺激分子,聯閤在腫瘤細胞中錶達IL-2或IL-2/B7,誘導機體抗腫瘤免疫應答,為IL-2基因治療進入臨床提供依據.方法:利用逆轉錄載體PLXSN構建瞭插入IL-2基因的重組逆轉錄病毒載體.將重組逆轉錄病毒載體引入包裝細胞CRIP,測病毒滴毒為6×105CFU/mL,用成熟重組逆轉錄病毒轉染小鼠胰腺癌細胞MPC-35,經G418篩選得抗性剋隆MPC-351,PCR檢測證實目的基因已整閤在MPC-35細胞基因組中;引入攜帶B7基因的腺病毒載體轉染MPC-351,經流式細胞儀證實B7基因已在MPC-351中穫得錶達,命名為MPC-352.結果:採用ELISA方法檢測MPC-351、MPC-352分泌IL-2水平分彆為95.5 U/mL及92.5 U/mL,與親代MPC-35比較,MPC-351體外增長率及形態無明顯變化;MPC-352無形態的改變,但增長速度減緩,流式細胞儀測試顯示:MPC-35本身不錶達MHC-class Ⅰ類分子,MPC-351有ICAM-1的錶達增加,MPC-352有class Ⅱ和ICAM-Ⅰ的錶達增加;小鼠體內移瘤實驗錶明:與作為對照的MPC-35細胞相比,MPC-351,MPC-352在小鼠體內的生長明顯受抑製,齣瘤時間晚(P＜0.05),瘤塊小(P＜0.01),生命時間延長(P＜0.01).
목적:IL-2시일충구유항종류작용적세포인자,B7시유도세포면역적공자격분자,연합재종류세포중표체IL-2혹IL-2/B7,유도궤체항종류면역응답,위IL-2기인치료진입림상제공의거.방법:이용역전록재체PLXSN구건료삽입IL-2기인적중조역전록병독재체.장중조역전록병독재체인입포장세포CRIP,측병독적독위6×105CFU/mL,용성숙중조역전록병독전염소서이선암세포MPC-35,경G418사선득항성극륭MPC-351,PCR검측증실목적기인이정합재MPC-35세포기인조중;인입휴대B7기인적선병독재체전염MPC-351,경류식세포의증실B7기인이재MPC-351중획득표체,명명위MPC-352.결과:채용ELISA방법검측MPC-351、MPC-352분비IL-2수평분별위95.5 U/mL급92.5 U/mL,여친대MPC-35비교,MPC-351체외증장솔급형태무명현변화;MPC-352무형태적개변,단증장속도감완,류식세포의측시현시:MPC-35본신불표체MHC-class Ⅰ류분자,MPC-351유ICAM-1적표체증가,MPC-352유class Ⅱ화ICAM-Ⅰ적표체증가;소서체내이류실험표명:여작위대조적MPC-35세포상비,MPC-351,MPC-352재소서체내적생장명현수억제,출류시간만(P＜0.05),류괴소(P＜0.01),생명시간연장(P＜0.01).
