细胞生物学杂志
細胞生物學雜誌
세포생물학잡지
CHINESE JOURNAL OF CELL BIOLOGY
2004年
2期
189-192
,共4页
张婷婷%高静%杨晓荷%许琳%徐江英
張婷婷%高靜%楊曉荷%許琳%徐江英
장정정%고정%양효하%허림%서강영
叠氮钠%过氧化氢%氧化应激%硫氧还蛋白还原酶(TR)
疊氮鈉%過氧化氫%氧化應激%硫氧還蛋白還原酶(TR)
첩담납%과양화경%양화응격%류양환단백환원매(TR)
过度氧化应激是诱发许多神经退变病的重要因素.叠氮钠(NaN3)是线粒体有氧呼吸链细胞色素c氧化酶(COX)的特异性抑制剂,过氧化氢(H2O2)释放氧自由基造成氧化损伤,两者都可以用于氧化应激情况下神经元损伤模型的建立.硫氧还蛋白还原酶(thioredoxin reductase,TR)特异性的还原氧化型的硫氧还蛋白(thioredoxin,TRx),调节细胞中氧化还原的平衡.现以不同浓度NaN3或H2O2处理人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y细胞),建立损伤模型.通过MTT法、形态学方法检测SH-SY5Y细胞损伤程度.同时,通过Western blot定量法、免疫细胞化学法,检测损伤的SH-SY5Y细胞中TR含量的改变,观察TR在胞内的分布.实验表明,NaN3、H2O2均以浓度依赖方式损伤SH-SY5Y细胞;TR分布于SH-SY5Y细胞的胞浆,表明TR是一种分泌蛋白,损伤后分布无明显变化.但一定浓度的NaN3作用后3h,胞内TR水平显著降低,即神经系统内呼吸链受损可抑制TR的表达,为神经退变病的防治提供了新的思路.
過度氧化應激是誘髮許多神經退變病的重要因素.疊氮鈉(NaN3)是線粒體有氧呼吸鏈細胞色素c氧化酶(COX)的特異性抑製劑,過氧化氫(H2O2)釋放氧自由基造成氧化損傷,兩者都可以用于氧化應激情況下神經元損傷模型的建立.硫氧還蛋白還原酶(thioredoxin reductase,TR)特異性的還原氧化型的硫氧還蛋白(thioredoxin,TRx),調節細胞中氧化還原的平衡.現以不同濃度NaN3或H2O2處理人神經母細胞瘤細胞(SH-SY5Y細胞),建立損傷模型.通過MTT法、形態學方法檢測SH-SY5Y細胞損傷程度.同時,通過Western blot定量法、免疫細胞化學法,檢測損傷的SH-SY5Y細胞中TR含量的改變,觀察TR在胞內的分佈.實驗錶明,NaN3、H2O2均以濃度依賴方式損傷SH-SY5Y細胞;TR分佈于SH-SY5Y細胞的胞漿,錶明TR是一種分泌蛋白,損傷後分佈無明顯變化.但一定濃度的NaN3作用後3h,胞內TR水平顯著降低,即神經繫統內呼吸鏈受損可抑製TR的錶達,為神經退變病的防治提供瞭新的思路.
과도양화응격시유발허다신경퇴변병적중요인소.첩담납(NaN3)시선립체유양호흡련세포색소c양화매(COX)적특이성억제제,과양화경(H2O2)석방양자유기조성양화손상,량자도가이용우양화응격정황하신경원손상모형적건립.류양환단백환원매(thioredoxin reductase,TR)특이성적환원양화형적류양환단백(thioredoxin,TRx),조절세포중양화환원적평형.현이불동농도NaN3혹H2O2처리인신경모세포류세포(SH-SY5Y세포),건립손상모형.통과MTT법、형태학방법검측SH-SY5Y세포손상정도.동시,통과Western blot정량법、면역세포화학법,검측손상적SH-SY5Y세포중TR함량적개변,관찰TR재포내적분포.실험표명,NaN3、H2O2균이농도의뢰방식손상SH-SY5Y세포;TR분포우SH-SY5Y세포적포장,표명TR시일충분비단백,손상후분포무명현변화.단일정농도적NaN3작용후3h,포내TR수평현저강저,즉신경계통내호흡련수손가억제TR적표체,위신경퇴변병적방치제공료신적사로.