中国实验动物学报
中國實驗動物學報
중국실험동물학보
ACTA LABORATORIUM ANIMALIS SCIENTIA SINICA
2008年
2期
105-110
,共6页
季樱红%卢奕%李娜%金红%杨芃原
季櫻紅%盧奕%李娜%金紅%楊芃原
계앵홍%로혁%리나%금홍%양봉원
小鼠晶体蛋白%蛋白质组%双向凝胶电泳%质谱
小鼠晶體蛋白%蛋白質組%雙嚮凝膠電泳%質譜
소서정체단백%단백질조%쌍향응효전영%질보
目的 应用双向电泳和质谱技术研究5周龄小鼠晶体蛋白质组.方法 提取小鼠晶体总蛋白,进行固相pH梯度 (IPG) 等电聚焦双向电泳,胶体考马斯亮蓝R-250染色,使用P DQuest 7.30图像分析软件分析电泳图像.选择主要蛋白点胶上酶解,应用基质辅助激光解析电离飞行时间/飞行时间 (MALDI-TOF/TOF) 仪器进行串联质谱 (MS/MS) 鉴定. 结果 上样量为882 μg和190 μg时,分别检测370±41蛋白点 (n=3) 和57±5 个蛋白点 (n=3).高上样量能够较好地分离晶体低丰度蛋白,如念珠状纤维结构蛋白BFSP ;低上样量可很好地分离高丰度蛋白-晶体蛋白 (包括αA、αB;βA1～βA4;βB1～β B3;γA～γF和γS等).质谱鉴定得到1种细胞骨架蛋白和16种高丰度晶体蛋白.结论 双向电泳和质谱技术有效考察了晶体总蛋白质,为分析白内障形成过程中蛋白质的表达改变提供了新的方法和途径.
目的 應用雙嚮電泳和質譜技術研究5週齡小鼠晶體蛋白質組.方法 提取小鼠晶體總蛋白,進行固相pH梯度 (IPG) 等電聚焦雙嚮電泳,膠體攷馬斯亮藍R-250染色,使用P DQuest 7.30圖像分析軟件分析電泳圖像.選擇主要蛋白點膠上酶解,應用基質輔助激光解析電離飛行時間/飛行時間 (MALDI-TOF/TOF) 儀器進行串聯質譜 (MS/MS) 鑒定. 結果 上樣量為882 μg和190 μg時,分彆檢測370±41蛋白點 (n=3) 和57±5 箇蛋白點 (n=3).高上樣量能夠較好地分離晶體低豐度蛋白,如唸珠狀纖維結構蛋白BFSP ;低上樣量可很好地分離高豐度蛋白-晶體蛋白 (包括αA、αB;βA1～βA4;βB1～β B3;γA～γF和γS等).質譜鑒定得到1種細胞骨架蛋白和16種高豐度晶體蛋白.結論 雙嚮電泳和質譜技術有效攷察瞭晶體總蛋白質,為分析白內障形成過程中蛋白質的錶達改變提供瞭新的方法和途徑.
목적 응용쌍향전영화질보기술연구5주령소서정체단백질조.방법 제취소서정체총단백,진행고상pH제도 (IPG) 등전취초쌍향전영,효체고마사량람R-250염색,사용P DQuest 7.30도상분석연건분석전영도상.선택주요단백점효상매해,응용기질보조격광해석전리비행시간/비행시간 (MALDI-TOF/TOF) 의기진행천련질보 (MS/MS) 감정. 결과 상양량위882 μg화190 μg시,분별검측370±41단백점 (n=3) 화57±5 개단백점 (n=3).고상양량능구교호지분리정체저봉도단백,여념주상섬유결구단백BFSP ;저상양량가흔호지분리고봉도단백-정체단백 (포괄αA、αB;βA1～βA4;βB1～β B3;γA～γF화γS등).질보감정득도1충세포골가단백화16충고봉도정체단백.결론 쌍향전영화질보기술유효고찰료정체총단백질,위분석백내장형성과정중단백질적표체개변제공료신적방법화도경.
