CAJ | 학술논문

背景:各种外界应力对细胞增殖有重要作用,但涉及骨髓间充质干细胞最佳压力及加载时间的力学研究尚少.目的:探讨周期性压力培养对兔骨髓间充质干细胞增殖活性及细胞周期的影响.设计、时间及地点:细胞学体外对照实验,于2008～01/08在南昌大学重点分子生物实验中心完成.材料:健康6周龄雄性新西兰大白兔4只,由南昌大学实验动物中心提供.自行改制的细胞压力加载装置专利号ZL2006-2-0097266.3. 方法:使用密度梯度离心法体外分离培养兔骨髓间充质干细胞,取生长良好的第3代细胞,按4×104个/孔接种于6孔板,设立5组:5.32,10.64,21.28,29.26 kPa压力组分别给予对应的压力,每日加压6h×3d;正常培养组细胞只接受正常大气压力学刺激,不予额外加压.主要观察指标:力学干预后,观察细胞形态及生长状况,MTT法检测细胞增殖,流式细胞仪测量细胞周期变化.收集细胞培养上清液,检测基质金属蛋白酶2的质量浓度.结果:6 h/d压力干预骨髓间充质干细胞,3d后细胞形态无异常变化,呈集落样生长.随着周期性压力的增加,细胞吸光度值逐渐升高,以21.28 kPa压力组为佳,但升高至29.26 kPa压力时吸光度值明显降低(F=-3.731,P=0.008).与正常培养组比较,5.32,10.64,21.28 kPa压力组细胞周期发生改变,增殖指数均明显升高(P<0.05或0.01),但29.26 kPa压力组增殖指数则明显下降.细胞培养上清液基质金属蛋白酶2质量浓度21.28 kPa压力组最低,29.26 kPa压力组最高,组间比较差异有显著性意义(t=213.214,P<0.001).结论:5.32-21.28 kPa周期性压力可以提高骨髓间充质干细胞的增殖能力,特别是21.28 kPa压力刺激促增殖作用尤为明显,但压力过强则抑制细胞增殖.
배경:각충외계응력대세포증식유중요작용,단섭급골수간충질간세포최가압력급가재시간적역학연구상소.목적:탐토주기성압력배양대토골수간충질간세포증식활성급세포주기적영향.설계、시간급지점:세포학체외대조실험,우2008～01/08재남창대학중점분자생물실험중심완성.재료:건강6주령웅성신서란대백토4지,유남창대학실험동물중심제공.자행개제적세포압력가재장치전리호ZL2006-2-0097266.3. 방법:사용밀도제도리심법체외분리배양토골수간충질간세포,취생장량호적제3대세포,안4×104개/공접충우6공판,설립5조:5.32,10.64,21.28,29.26 kPa압력조분별급여대응적압력,매일가압6h×3d;정상배양조세포지접수정상대기압역학자격,불여액외가압.주요관찰지표:역학간예후,관찰세포형태급생장상황,MTT법검측세포증식,류식세포의측량세포주기변화.수집세포배양상청액,검측기질금속단백매2적질량농도.결과:6 h/d압력간예골수간충질간세포,3d후세포형태무이상변화,정집락양생장.수착주기성압력적증가,세포흡광도치축점승고,이21.28 kPa압력조위가,단승고지29.26 kPa압력시흡광도치명현강저(F=-3.731,P=0.008).여정상배양조비교,5.32,10.64,21.28 kPa압력조세포주기발생개변,증식지수균명현승고(P<0.05혹0.01),단29.26 kPa압력조증식지수칙명현하강.세포배양상청액기질금속단백매2질량농도21.28 kPa압력조최저,29.26 kPa압력조최고,조간비교차이유현저성의의(t=213.214,P<0.001).결론:5.32-21.28 kPa주기성압력가이제고골수간충질간세포적증식능력,특별시21.28 kPa압력자격촉증식작용우위명현,단압력과강칙억제세포증식.