河南科学
河南科學
하남과학
HENAN SCIENCE
2009年
8期
930-934
,共5页
王泽%王磊%谢来峰%樊晋宇%徐存拴
王澤%王磊%謝來峰%樊晉宇%徐存拴
왕택%왕뢰%사래봉%번진우%서존전
大鼠%细胞分离和鉴定%窦内皮细胞%免疫磁珠%标记蛋白
大鼠%細胞分離和鑒定%竇內皮細胞%免疫磁珠%標記蛋白
대서%세포분리화감정%두내피세포%면역자주%표기단백
按Higgins等方法制作大鼠2/3肝切除(parital hepatectomy,PH)模型,用两步灌流法分散肝脏细胞,用60%Percoll梯度离心和免疫磁珠分离肝窦内皮细胞(hepatic sinusoidal endotllelial cell,SEC),用分化抗原簇14(clusterof differentiation 14,CD14)和内皮素1(endothelin-1,ET-1)的免疫组织化学定性,定位再生肝(regenerating liver,RL)、分散的肝脏细胞及分离的窦内皮细胞,用RT-PCR定量窦内皮细胞的CD14和ET-1的mRNA,用蛋白免疫印迹方法定量窦内皮细胞的CD14和ET-1蛋白.初步证实,分离的窦内皮细胞中CD14和ET-1阳性细胞占95%以上,从PH后各时间点分离的窦内皮细胞的CD14和ET-1 mRNA量稳定,相应的蛋白量亦稳定,表明改进的分离窦内皮细胞方法具有收率和纯度高,活性好等特点,值得采用.
按Higgins等方法製作大鼠2/3肝切除(parital hepatectomy,PH)模型,用兩步灌流法分散肝髒細胞,用60%Percoll梯度離心和免疫磁珠分離肝竇內皮細胞(hepatic sinusoidal endotllelial cell,SEC),用分化抗原簇14(clusterof differentiation 14,CD14)和內皮素1(endothelin-1,ET-1)的免疫組織化學定性,定位再生肝(regenerating liver,RL)、分散的肝髒細胞及分離的竇內皮細胞,用RT-PCR定量竇內皮細胞的CD14和ET-1的mRNA,用蛋白免疫印跡方法定量竇內皮細胞的CD14和ET-1蛋白.初步證實,分離的竇內皮細胞中CD14和ET-1暘性細胞佔95%以上,從PH後各時間點分離的竇內皮細胞的CD14和ET-1 mRNA量穩定,相應的蛋白量亦穩定,錶明改進的分離竇內皮細胞方法具有收率和純度高,活性好等特點,值得採用.
안Higgins등방법제작대서2/3간절제(parital hepatectomy,PH)모형,용량보관류법분산간장세포,용60%Percoll제도리심화면역자주분리간두내피세포(hepatic sinusoidal endotllelial cell,SEC),용분화항원족14(clusterof differentiation 14,CD14)화내피소1(endothelin-1,ET-1)적면역조직화학정성,정위재생간(regenerating liver,RL)、분산적간장세포급분리적두내피세포,용RT-PCR정량두내피세포적CD14화ET-1적mRNA,용단백면역인적방법정량두내피세포적CD14화ET-1단백.초보증실,분리적두내피세포중CD14화ET-1양성세포점95%이상,종PH후각시간점분리적두내피세포적CD14화ET-1 mRNA량은정,상응적단백량역은정,표명개진적분리두내피세포방법구유수솔화순도고,활성호등특점,치득채용.
