中国组织工程研究与临床康复
中國組織工程研究與臨床康複
중국조직공정연구여림상강복
JOURNAL OF CLINICAL REHABILITATIVE TISSUE ENGINEERING RESEARCH
2009年
36期
7133-7137
,共5页
苗宗宁%徐秋岚%吕国忠%王玲%张学光%Miao Zong-ning%Xu Qiu-lan%Lü Guo-zhong%Wang Ling%Zhang Xue-guang
苗宗寧%徐鞦嵐%呂國忠%王玲%張學光%Miao Zong-ning%Xu Qiu-lan%Lü Guo-zhong%Wang Ling%Zhang Xue-guang
묘종저%서추람%려국충%왕령%장학광%Miao Zong-ning%Xu Qiu-lan%Lü Guo-zhong%Wang Ling%Zhang Xue-guang
间充质干细胞%胎盘%分离培养
間充質榦細胞%胎盤%分離培養
간충질간세포%태반%분리배양
背景:由于间充质干细胞在成人骨髓的数量以及分化能力随年龄的增长而减低,不同的胎儿组织被用来研究是否存在间充质干细胞.胎盘组织中间充质干细胞主要分布在羊膜和绒毛膜等来源于胎儿的组织,其抗原表达、分化潜能与骨髓间充质干细胞特征相似.目的:观察间充质干细胞在人胎盘组织中的分布规律.设计、时间及地点:观察性实验,于2008-02/2009-03在无锡第三人民医院烧伤研究所完成.材料:在产妇知情同意的情况下,经医院伦理委员会批准,获取临床正常剖宫产之足月健康产妇的新鲜胎盘组织,所选择的胎盘脐带附着点均在胎盘中央或稍偏位,大小及质量在正常范围内.方法:将胎盘组织分为3组,分别是中央带组即脐带附着处,边缘带组即距脐带附着点最远处和中间带组即两者之间中点处.分别全层连续切片,以抗CD166、抗CD44、抗CD29分别做免疫荧光和免疫组织化学染色,显微镜下观察阳性细胞分布区域,采用HPIAS一1000彩色病理图像分析系统进行图像分析,同时应用整体灌注的方法分离培养细胞并用流式细胞仪鉴定原代和第6代培养细胞的表面标志.主要观察指标:组织切片免疫荧光和免疫组织化学染色阳性细胞表达及分布情况,分离培养细胞的生长情况以及细胞表面标志.结果:3个标记物CD166、CD44、CD29阳性表达细胞的分布情况较一致,主要集中于血管内皮下及血管附近间质内;胎盘中央带阳性细胞较集中,阳性表达的强度较强,边缘带阳性细胞稀少,阳性表达的强度较弱.整体灌注的方法可以分离培养细胞,流式细胞仪检测结果显示,原代以及第6代胎盘间充质干细胞均表达CD105、CD106和CD166,不表达CD34和HLA-Dr,两代细胞表达强度无明显区别,与骨髓间充质干细胞的表面标志相一致.结论:胎盘各部位均存在CD166、CD44、CD29阳性表达的细胞,细胞的分布与血管有一定的相关性,脐带附着处下方胎盘组织相对其他部位可能为间充质干细胞富集区域.
揹景:由于間充質榦細胞在成人骨髓的數量以及分化能力隨年齡的增長而減低,不同的胎兒組織被用來研究是否存在間充質榦細胞.胎盤組織中間充質榦細胞主要分佈在羊膜和絨毛膜等來源于胎兒的組織,其抗原錶達、分化潛能與骨髓間充質榦細胞特徵相似.目的:觀察間充質榦細胞在人胎盤組織中的分佈規律.設計、時間及地點:觀察性實驗,于2008-02/2009-03在無錫第三人民醫院燒傷研究所完成.材料:在產婦知情同意的情況下,經醫院倫理委員會批準,穫取臨床正常剖宮產之足月健康產婦的新鮮胎盤組織,所選擇的胎盤臍帶附著點均在胎盤中央或稍偏位,大小及質量在正常範圍內.方法:將胎盤組織分為3組,分彆是中央帶組即臍帶附著處,邊緣帶組即距臍帶附著點最遠處和中間帶組即兩者之間中點處.分彆全層連續切片,以抗CD166、抗CD44、抗CD29分彆做免疫熒光和免疫組織化學染色,顯微鏡下觀察暘性細胞分佈區域,採用HPIAS一1000綵色病理圖像分析繫統進行圖像分析,同時應用整體灌註的方法分離培養細胞併用流式細胞儀鑒定原代和第6代培養細胞的錶麵標誌.主要觀察指標:組織切片免疫熒光和免疫組織化學染色暘性細胞錶達及分佈情況,分離培養細胞的生長情況以及細胞錶麵標誌.結果:3箇標記物CD166、CD44、CD29暘性錶達細胞的分佈情況較一緻,主要集中于血管內皮下及血管附近間質內;胎盤中央帶暘性細胞較集中,暘性錶達的彊度較彊,邊緣帶暘性細胞稀少,暘性錶達的彊度較弱.整體灌註的方法可以分離培養細胞,流式細胞儀檢測結果顯示,原代以及第6代胎盤間充質榦細胞均錶達CD105、CD106和CD166,不錶達CD34和HLA-Dr,兩代細胞錶達彊度無明顯區彆,與骨髓間充質榦細胞的錶麵標誌相一緻.結論:胎盤各部位均存在CD166、CD44、CD29暘性錶達的細胞,細胞的分佈與血管有一定的相關性,臍帶附著處下方胎盤組織相對其他部位可能為間充質榦細胞富集區域.
배경:유우간충질간세포재성인골수적수량이급분화능력수년령적증장이감저,불동적태인조직피용래연구시부존재간충질간세포.태반조직중간충질간세포주요분포재양막화융모막등래원우태인적조직,기항원표체、분화잠능여골수간충질간세포특정상사.목적:관찰간충질간세포재인태반조직중적분포규률.설계、시간급지점:관찰성실험,우2008-02/2009-03재무석제삼인민의원소상연구소완성.재료:재산부지정동의적정황하,경의원윤리위원회비준,획취림상정상부궁산지족월건강산부적신선태반조직,소선택적태반제대부착점균재태반중앙혹초편위,대소급질량재정상범위내.방법:장태반조직분위3조,분별시중앙대조즉제대부착처,변연대조즉거제대부착점최원처화중간대조즉량자지간중점처.분별전층련속절편,이항CD166、항CD44、항CD29분별주면역형광화면역조직화학염색,현미경하관찰양성세포분포구역,채용HPIAS일1000채색병리도상분석계통진행도상분석,동시응용정체관주적방법분리배양세포병용류식세포의감정원대화제6대배양세포적표면표지.주요관찰지표:조직절편면역형광화면역조직화학염색양성세포표체급분포정황,분리배양세포적생장정황이급세포표면표지.결과:3개표기물CD166、CD44、CD29양성표체세포적분포정황교일치,주요집중우혈관내피하급혈관부근간질내;태반중앙대양성세포교집중,양성표체적강도교강,변연대양성세포희소,양성표체적강도교약.정체관주적방법가이분리배양세포,류식세포의검측결과현시,원대이급제6대태반간충질간세포균표체CD105、CD106화CD166,불표체CD34화HLA-Dr,량대세포표체강도무명현구별,여골수간충질간세포적표면표지상일치.결론:태반각부위균존재CD166、CD44、CD29양성표체적세포,세포적분포여혈관유일정적상관성,제대부착처하방태반조직상대기타부위가능위간충질간세포부집구역.
