山西医科大学学报
山西醫科大學學報
산서의과대학학보
JOURNAL OF SHANXI MEDICAL UNIVERSITY
2009年
11期
989-991,封3
,共4页
戴维德%曾晶%李晓松%刘凡光%顾瑛
戴維德%曾晶%李曉鬆%劉凡光%顧瑛
대유덕%증정%리효송%류범광%고영
光敏剂%亚细胞定位%图像%定量分析
光敏劑%亞細胞定位%圖像%定量分析
광민제%아세포정위%도상%정량분석
目的 探讨定量分析法在光敏剂亚细胞定位研究中的应用特点,并与图像观察法进行比较. 方法 传代培养A549肺癌细胞,分别与光敏剂血卟啉单甲醚孵共同孵育2,12,24 h.选择四种特异性细胞器荧光探针Rhodamine-123、Lucifer yellow、DiOC6(3)和BODIPY分别标记细胞内线粒体、溶酶体、内质网和高尔基体,倒置荧光显微镜和致冷CCD探测HMME和探针荧光图像.观察细胞中光敏剂和荧光探针各自的荧光图像并分析光敏剂在细胞中的分布特点.定量计算探针荧光高强度区域与细胞区域内的HMME荧光均量比IB/IA. 结果 图像观察法显示,孵育2,12,24 h,细胞内HMME几乎不进入细胞核,而主要弥散分布于细胞质及各细胞器.定量结果显示: A549肺癌细胞内,2 h时IB/IA由高到低为:高尔基体、溶酶体、线粒体、内质网;12 h时IB/IA由高到低为:高尔基体、溶酶体、内质网、线粒体;24 h时IB/IA由高到低为:高尔基体、内质网、溶酶体、线粒体;高尔基体组IB/IA随时间上升. 结论 应用定量分析法较图像观察法更可以准确反映出HMME在细胞内分布随着孵育时间变化的特点.
目的 探討定量分析法在光敏劑亞細胞定位研究中的應用特點,併與圖像觀察法進行比較. 方法 傳代培養A549肺癌細胞,分彆與光敏劑血卟啉單甲醚孵共同孵育2,12,24 h.選擇四種特異性細胞器熒光探針Rhodamine-123、Lucifer yellow、DiOC6(3)和BODIPY分彆標記細胞內線粒體、溶酶體、內質網和高爾基體,倒置熒光顯微鏡和緻冷CCD探測HMME和探針熒光圖像.觀察細胞中光敏劑和熒光探針各自的熒光圖像併分析光敏劑在細胞中的分佈特點.定量計算探針熒光高彊度區域與細胞區域內的HMME熒光均量比IB/IA. 結果 圖像觀察法顯示,孵育2,12,24 h,細胞內HMME幾乎不進入細胞覈,而主要瀰散分佈于細胞質及各細胞器.定量結果顯示: A549肺癌細胞內,2 h時IB/IA由高到低為:高爾基體、溶酶體、線粒體、內質網;12 h時IB/IA由高到低為:高爾基體、溶酶體、內質網、線粒體;24 h時IB/IA由高到低為:高爾基體、內質網、溶酶體、線粒體;高爾基體組IB/IA隨時間上升. 結論 應用定量分析法較圖像觀察法更可以準確反映齣HMME在細胞內分佈隨著孵育時間變化的特點.
목적 탐토정량분석법재광민제아세포정위연구중적응용특점,병여도상관찰법진행비교. 방법 전대배양A549폐암세포,분별여광민제혈계람단갑미부공동부육2,12,24 h.선택사충특이성세포기형광탐침Rhodamine-123、Lucifer yellow、DiOC6(3)화BODIPY분별표기세포내선립체、용매체、내질망화고이기체,도치형광현미경화치랭CCD탐측HMME화탐침형광도상.관찰세포중광민제화형광탐침각자적형광도상병분석광민제재세포중적분포특점.정량계산탐침형광고강도구역여세포구역내적HMME형광균량비IB/IA. 결과 도상관찰법현시,부육2,12,24 h,세포내HMME궤호불진입세포핵,이주요미산분포우세포질급각세포기.정량결과현시: A549폐암세포내,2 h시IB/IA유고도저위:고이기체、용매체、선립체、내질망;12 h시IB/IA유고도저위:고이기체、용매체、내질망、선립체;24 h시IB/IA유고도저위:고이기체、내질망、용매체、선립체;고이기체조IB/IA수시간상승. 결론 응용정량분석법교도상관찰법경가이준학반영출HMME재세포내분포수착부육시간변화적특점.
