动物医学进展
動物醫學進展
동물의학진전
PROGRESS IN VETERINARY MEDICINE
2011年
1期
9-14
,共6页
秦晓冰%牛晋国%杨瑞梅%韩先杰%孙月平%单虎
秦曉冰%牛晉國%楊瑞梅%韓先傑%孫月平%單虎
진효빙%우진국%양서매%한선걸%손월평%단호
特异性%细胞毒性T淋巴细胞%猪圆环病毒2型%重组鸡痘活疫苗%细胞免疫
特異性%細胞毒性T淋巴細胞%豬圓環病毒2型%重組鷄痘活疫苗%細胞免疫
특이성%세포독성T림파세포%저원배병독2형%중조계두활역묘%세포면역
通过基因工程的方法获得猪圆环病毒2型(PCV-2)二联重组鸡痘活载体疫苗vUTAL-P1-ORF2ORF1和核酸疫苗pVAX1IL-18ORF2ORF1.将采取不同的免疫方案接种本体动物猪,在二免后15 d分别采猪抗凝血,用淋巴细胞分离液处理,得到淋巴细胞作为效应细胞;构建重组质粒pDisplay-ORF2,并转染PK-15传代细胞,用G418多次筛选得到靶细胞.借助CytoTox 96 Non-Radioactive Cytotoxicity Assay试剂盒从细胞免疫水平的特异性细胞毒性T淋巴细胞杀伤活性评价该重组鸡痘活载体疫苗的免疫效果.结果表明,采用"Prime pVAX1-ORF2ORF1,boost vPUTALP1-ORF2ORF1"的免疫方案所获得的杀伤活性最高达66.005%±2.671%(效靶比50:1)和38.870%±2.883%(效靶比25:1),显著高于对照组(P＜0.01).说明vUTA-P1-ORF2ORF1可以诱导猪产生高水平的特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)杀伤活性,且以核酸疫苗首免,重组鸡痘活载体疫苗追加免疫的接种方案最优,为PCV-2基因工程疫苗的进一步研究奠定基础.
通過基因工程的方法穫得豬圓環病毒2型(PCV-2)二聯重組鷄痘活載體疫苗vUTAL-P1-ORF2ORF1和覈痠疫苗pVAX1IL-18ORF2ORF1.將採取不同的免疫方案接種本體動物豬,在二免後15 d分彆採豬抗凝血,用淋巴細胞分離液處理,得到淋巴細胞作為效應細胞;構建重組質粒pDisplay-ORF2,併轉染PK-15傳代細胞,用G418多次篩選得到靶細胞.藉助CytoTox 96 Non-Radioactive Cytotoxicity Assay試劑盒從細胞免疫水平的特異性細胞毒性T淋巴細胞殺傷活性評價該重組鷄痘活載體疫苗的免疫效果.結果錶明,採用"Prime pVAX1-ORF2ORF1,boost vPUTALP1-ORF2ORF1"的免疫方案所穫得的殺傷活性最高達66.005%±2.671%(效靶比50:1)和38.870%±2.883%(效靶比25:1),顯著高于對照組(P＜0.01).說明vUTA-P1-ORF2ORF1可以誘導豬產生高水平的特異性細胞毒性T淋巴細胞(CTL)殺傷活性,且以覈痠疫苗首免,重組鷄痘活載體疫苗追加免疫的接種方案最優,為PCV-2基因工程疫苗的進一步研究奠定基礎.
통과기인공정적방법획득저원배병독2형(PCV-2)이련중조계두활재체역묘vUTAL-P1-ORF2ORF1화핵산역묘pVAX1IL-18ORF2ORF1.장채취불동적면역방안접충본체동물저,재이면후15 d분별채저항응혈,용림파세포분리액처리,득도림파세포작위효응세포;구건중조질립pDisplay-ORF2,병전염PK-15전대세포,용G418다차사선득도파세포.차조CytoTox 96 Non-Radioactive Cytotoxicity Assay시제합종세포면역수평적특이성세포독성T림파세포살상활성평개해중조계두활재체역묘적면역효과.결과표명,채용"Prime pVAX1-ORF2ORF1,boost vPUTALP1-ORF2ORF1"적면역방안소획득적살상활성최고체66.005%±2.671%(효파비50:1)화38.870%±2.883%(효파비25:1),현저고우대조조(P＜0.01).설명vUTA-P1-ORF2ORF1가이유도저산생고수평적특이성세포독성T림파세포(CTL)살상활성,차이핵산역묘수면,중조계두활재체역묘추가면역적접충방안최우,위PCV-2기인공정역묘적진일보연구전정기출.
