中国医科大学学报
中國醫科大學學報
중국의과대학학보
JOURNAL OF CHINA MEDICAL UNIVERSITY
2011年
1期
27-29
,共3页
王建平%张梅英%徐小燕%王巍%夏蒲%郑志宏%王禄增%高野康雄%郑华川
王建平%張梅英%徐小燕%王巍%夏蒲%鄭誌宏%王祿增%高野康雄%鄭華川
왕건평%장매영%서소연%왕외%하포%정지굉%왕록증%고야강웅%정화천
JC病毒%T抗原%转基因鼠%晶状体
JC病毒%T抗原%轉基因鼠%晶狀體
JC병독%T항원%전기인서%정상체
目的 利用α-crystallin启动子构建晶状体上皮细胞中JCV T抗原表达转基因鼠,试图建立晶状体自发肿瘤动物模型.方法 利用限制性内切酶(Bcll)分离pBSK(pBluescript SK)-T抗原,BamH I同尾连接插入以pBSK为载体的α-crystallin启动子下游,通过Ncil酶切电泳分离带有α-crystallin启动子的T抗原核酸序列后显微注射入C57BL/6J小鼠受精卵中.PCR检测转基因阳性鼠及JCV病毒T抗原拷贝数,大体和组织学观察眼球及病变组织,免疫组织化学观察T抗原、p53和β-catenin表达.结果 成功构建α-crystallin JCV T抗原表达质粒,转基因阳性鼠中2号鼠(αAT-2)拷贝数最高,该鼠眼球于11个月表现出肿瘤样改变,肿瘤细胞中T抗原、p53和β-catenin呈强阳性表达.结论 JCV T抗原直接诱发晶状体上皮肿瘤动物模型建立为JCV T抗原嵌入所致上皮肿瘤提供了直接实验依据,为JCV所致上皮肿瘤发生和演进分子机理研究奠定坚实基础,同时为抗肿瘤药物筛选及基因治疗监控提供了良好的动物模型.
目的 利用α-crystallin啟動子構建晶狀體上皮細胞中JCV T抗原錶達轉基因鼠,試圖建立晶狀體自髮腫瘤動物模型.方法 利用限製性內切酶(Bcll)分離pBSK(pBluescript SK)-T抗原,BamH I同尾連接插入以pBSK為載體的α-crystallin啟動子下遊,通過Ncil酶切電泳分離帶有α-crystallin啟動子的T抗原覈痠序列後顯微註射入C57BL/6J小鼠受精卵中.PCR檢測轉基因暘性鼠及JCV病毒T抗原拷貝數,大體和組織學觀察眼毬及病變組織,免疫組織化學觀察T抗原、p53和β-catenin錶達.結果 成功構建α-crystallin JCV T抗原錶達質粒,轉基因暘性鼠中2號鼠(αAT-2)拷貝數最高,該鼠眼毬于11箇月錶現齣腫瘤樣改變,腫瘤細胞中T抗原、p53和β-catenin呈彊暘性錶達.結論 JCV T抗原直接誘髮晶狀體上皮腫瘤動物模型建立為JCV T抗原嵌入所緻上皮腫瘤提供瞭直接實驗依據,為JCV所緻上皮腫瘤髮生和縯進分子機理研究奠定堅實基礎,同時為抗腫瘤藥物篩選及基因治療鑑控提供瞭良好的動物模型.
목적 이용α-crystallin계동자구건정상체상피세포중JCV T항원표체전기인서,시도건립정상체자발종류동물모형.방법 이용한제성내절매(Bcll)분리pBSK(pBluescript SK)-T항원,BamH I동미련접삽입이pBSK위재체적α-crystallin계동자하유,통과Ncil매절전영분리대유α-crystallin계동자적T항원핵산서렬후현미주사입C57BL/6J소서수정란중.PCR검측전기인양성서급JCV병독T항원고패수,대체화조직학관찰안구급병변조직,면역조직화학관찰T항원、p53화β-catenin표체.결과 성공구건α-crystallin JCV T항원표체질립,전기인양성서중2호서(αAT-2)고패수최고,해서안구우11개월표현출종류양개변,종류세포중T항원、p53화β-catenin정강양성표체.결론 JCV T항원직접유발정상체상피종류동물모형건립위JCV T항원감입소치상피종류제공료직접실험의거,위JCV소치상피종류발생화연진분자궤리연구전정견실기출,동시위항종류약물사선급기인치료감공제공료량호적동물모형.
