CAJ | 학술논문

目的:分析补骨脂酚代谢的细胞色素P450( cytochrome P450,CYP)表型,并在体外研究人肝微粒体(human liver microsomes,HLM)对补骨脂酚代谢减毒的机制.方法:用HLM与化学抑制剂合用法以及人源重组CYP酶法分析代谢补骨脂酚的CYP酶亚型.用HPLC-MS法分析CYP亚型酶特异底物的代谢产物生成量,研究CYP酶广谱抑制剂1-氨基苯并三唑(1 -aminobenzotriazole,ABT)对HLM中CYP亚型酶活性的抑制作用.用HPLC法分析补骨脂酚在HLM孵育液中的浓度,研究ABT对其代谢的影响.应用MTT法检测人肾近曲小管上皮细胞(human kidney-2,HK-2)的存活率来评价补骨脂酚对HK-2的毒性作用以及HLM中CYP酶和ABT对其毒性的影响.结果:HLM中的CYP1 A2、CYP2C9、CYP2C19和CYP3A4参与了补骨脂酚的代谢,其中以CYP2C19的代谢转化率最高；2.5 mmol/L ABT能明显抑制0.5 g/L HLM中上述4种CYP同工酶活性,抑制率达到90％以上；2.5 mmol/L ABT对补骨脂酚在HLM的代谢抑制率为83.24％±2.13％.在HK-2细胞存活率实验中,ABT能显著降低HLM对30 ～90μmol/L补骨脂酚的代谢减毒作用(P＜0.05).结论:HLM减低补骨脂酚HK-2细胞毒性的作用与HLM中CYP酶将补骨脂酚代谢转化为无毒或毒性较小的代谢产物有关,应用CYP酶广谱抑制剂能逆转HLM对补骨脂酚的代谢解毒作用.
목적:분석보골지분대사적세포색소P450( cytochrome P450,CYP)표형,병재체외연구인간미립체(human liver microsomes,HLM)대보골지분대사감독적궤제.방법:용HLM여화학억제제합용법이급인원중조CYP매법분석대사보골지분적CYP매아형.용HPLC-MS법분석CYP아형매특이저물적대사산물생성량,연구CYP매엄보억제제1-안기분병삼서(1 -aminobenzotriazole,ABT)대HLM중CYP아형매활성적억제작용.용HPLC법분석보골지분재HLM부육액중적농도,연구ABT대기대사적영향.응용MTT법검측인신근곡소관상피세포(human kidney-2,HK-2)적존활솔래평개보골지분대HK-2적독성작용이급HLM중CYP매화ABT대기독성적영향.결과:HLM중적CYP1 A2、CYP2C9、CYP2C19화CYP3A4삼여료보골지분적대사,기중이CYP2C19적대사전화솔최고；2.5 mmol/L ABT능명현억제0.5 g/L HLM중상술4충CYP동공매활성,억제솔체도90％이상；2.5 mmol/L ABT대보골지분재HLM적대사억제솔위83.24％±2.13％.재HK-2세포존활솔실험중,ABT능현저강저HLM대30 ～90μmol/L보골지분적대사감독작용(P＜0.05).결론:HLM감저보골지분HK-2세포독성적작용여HLM중CYP매장보골지분대사전화위무독혹독성교소적대사산물유관,응용CYP매엄보억제제능역전HLM대보골지분적대사해독작용.