CAJ | 학술논문

目的克隆我国分离的汉坦病毒A9株L片段全长cDNA,并测定其核苷酸序列.方法用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术分段扩增汉坦病毒A9株全部L片段,用T-A克隆方法进行PCR产物克隆,测定PCR产物的核苷酸序列.通过亚克隆将分段的L片段连接成全长cDNA克隆.结果 A9株的基因组L片段长度为6 533个核苷酸,腺嘌呤核苷酸和尿嘧啶核苷酸丰富(%A+U=62.47).包含有一个单一的开放读码框架(ORF),编码一个标准的质量为2.46×105的蛋白,含有2 151个氨基酸.A9株与76-118、C1-1和C1-2株的同源性最高,达到83.8%.与TULA病毒的关系较远,其核酸序列的同源性为65.8%.将推导的A9株编码的氨基酸序列与其他21种负链RNA病毒的依赖RNA的RNA聚合酶的氨基酸序列以及汉坦病毒几个代表株的L片段氨基酸序列进行比较,显示A9编码的RNA聚合酶也有6个比较保守的区域以及几个极端保守的氨基酸残基.结论汉坦病毒A9株L片段具有和其他汉坦病毒RNA聚合酶相似的核苷酸一级结构,通过对推导的氨基酸分析,该片段具有一些在RNA病毒聚合酶中都存在的保守区域.
목적극륭아국분리적한탄병독A9주L편단전장cDNA,병측정기핵감산서렬.방법용역전록-취합매련반응(RT-PCR)기술분단확증한탄병독A9주전부L편단,용T-A극륭방법진행PCR산물극륭,측정PCR산물적핵감산서렬.통과아극륭장분단적L편단련접성전장cDNA극륭.결과 A9주적기인조L편단장도위6 533개핵감산,선표령핵감산화뇨밀정핵감산봉부(%A+U=62.47).포함유일개단일적개방독마광가(ORF),편마일개표준적질량위2.46×105적단백,함유2 151개안기산.A9주여76-118、C1-1화C1-2주적동원성최고,체도83.8%.여TULA병독적관계교원,기핵산서렬적동원성위65.8%.장추도적A9주편마적안기산서렬여기타21충부련RNA병독적의뢰RNA적RNA취합매적안기산서렬이급한탄병독궤개대표주적L편단안기산서렬진행비교,현시A9편마적RNA취합매야유6개비교보수적구역이급궤개겁단보수적안기산잔기.결론한탄병독A9주L편단구유화기타한탄병독RNA취합매상사적핵감산일급결구,통과대추도적안기산분석,해편단구유일사재RNA병독취합매중도존재적보수구역.