CAJ | 학술논문

背景与目的:人乳腺癌候选抑制蛋白1(breast cancer suppressor candidate 1,BCSC-1)基因已被证实是一种新型抑癌基因,在多种肿瘤细胞均存在表达缺失的现象.该研究通过将BCSC-1基因转染至人小细胞肺癌细胞株NCI-H446,探讨BCSC-1基因异位表达对NCI-H446细胞增殖的抑制效应.方法:用PCR扩增BCSC-1 cDNA,构建真核重组表达载体pcDNA3.1/v5-HisB-BCSC-1.通过脂质体把pcDNA3.1/v5-HisB-BCSC-1和空质粒pcDNA3.1/v5-HisB转染入野生型NCI-H446细胞.以转染空质粒pcDNA3.1/v5-HisB的NCI-H446细胞为对照组,野生型NCI-H446细胞为空白对照组.采用流式细胞仪检测细胞周期;MTT法检测细胞增殖;免疫组化确认BCSC-1基因和CD44分子在NCI-H446细胞中的表达.结果:成功构建了真核重组表达载体pcDNA3.1/v5-HisB-BCSC-1,制备了BCSC-1基因异位高表达的NCI-H446稳定细胞株.细胞周期分析显示,异位表达BCSC-1的NCI-H446细胞大部分阻滞在G0/G1期,明显高于对照组和空白组(P<0.01).MTT法检测显示,异位表达BCSC-1的NCI-H446细胞与对照组、空白组相比,生长速度明显减慢(P<0.05).免疫组化显示异位表达BCSC-1的NCI-H446细胞CD44表达增高.结论:BCSC-1基因的异位表达对NCI-H446细胞的恶性增殖行为有明显的抑制作用,这种抑制作用可能与细胞周期阻滞和黏附分子CD44表达增高有关.
배경여목적:인유선암후선억제단백1(breast cancer suppressor candidate 1,BCSC-1)기인이피증실시일충신형억암기인,재다충종류세포균존재표체결실적현상.해연구통과장BCSC-1기인전염지인소세포폐암세포주NCI-H446,탐토BCSC-1기인이위표체대NCI-H446세포증식적억제효응.방법:용PCR확증BCSC-1 cDNA,구건진핵중조표체재체pcDNA3.1/v5-HisB-BCSC-1.통과지질체파pcDNA3.1/v5-HisB-BCSC-1화공질립pcDNA3.1/v5-HisB전염입야생형NCI-H446세포.이전염공질립pcDNA3.1/v5-HisB적NCI-H446세포위대조조,야생형NCI-H446세포위공백대조조.채용류식세포의검측세포주기;MTT법검측세포증식;면역조화학인BCSC-1기인화CD44분자재NCI-H446세포중적표체.결과:성공구건료진핵중조표체재체pcDNA3.1/v5-HisB-BCSC-1,제비료BCSC-1기인이위고표체적NCI-H446은정세포주.세포주기분석현시,이위표체BCSC-1적NCI-H446세포대부분조체재G0/G1기,명현고우대조조화공백조(P<0.01).MTT법검측현시,이위표체BCSC-1적NCI-H446세포여대조조、공백조상비,생장속도명현감만(P<0.05).면역조화현시이위표체BCSC-1적NCI-H446세포CD44표체증고.결론:BCSC-1기인적이위표체대NCI-H446세포적악성증식행위유명현적억제작용,저충억제작용가능여세포주기조체화점부분자CD44표체증고유관.