安徽农业科学
安徽農業科學
안휘농업과학
JOURNAL OF ANHUI AGRICULTURAL SCIENCES
2011年
29期
17935-17936
,共2页
王妍%金春梅%崔海鹏%金永军%张厚双%张守发
王妍%金春梅%崔海鵬%金永軍%張厚雙%張守髮
왕연%금춘매%최해붕%금영군%장후쌍%장수발
弓形虫%ANA1%重组蛋白
弓形蟲%ANA1%重組蛋白
궁형충%ANA1%중조단백
[目的]构建截短型AMA1的原核表达载体,并进行体外诱导表达,为在体外表达弓形虫AMA1重组蛋白.[方法]设计去掉弓形虫AMA1信号肽的PCR引物,以弓形虫cDNA为模板进行PCR扩增,PCR扩增产物酶切后与pGEX-4T-3原核表达载体连接,并转化到BL21感受态细胞内.对经PCR鉴定为阳性的重组质粒pGEX-4T-3-AMA1进行体外诱导表达.[结果]成功构建了弓形虫AMA1的原核表达质粒pGEX-4T-3-AMA1,通过体外诱导表明,AMA1融合蛋白是以包涵体的形式存在.[结论]弓形虫AMA1蛋白的体外表达为进一步制备抗AMA1血清及免疫学实验奠定了基础.
[目的]構建截短型AMA1的原覈錶達載體,併進行體外誘導錶達,為在體外錶達弓形蟲AMA1重組蛋白.[方法]設計去掉弓形蟲AMA1信號肽的PCR引物,以弓形蟲cDNA為模闆進行PCR擴增,PCR擴增產物酶切後與pGEX-4T-3原覈錶達載體連接,併轉化到BL21感受態細胞內.對經PCR鑒定為暘性的重組質粒pGEX-4T-3-AMA1進行體外誘導錶達.[結果]成功構建瞭弓形蟲AMA1的原覈錶達質粒pGEX-4T-3-AMA1,通過體外誘導錶明,AMA1融閤蛋白是以包涵體的形式存在.[結論]弓形蟲AMA1蛋白的體外錶達為進一步製備抗AMA1血清及免疫學實驗奠定瞭基礎.
[목적]구건절단형AMA1적원핵표체재체,병진행체외유도표체,위재체외표체궁형충AMA1중조단백.[방법]설계거도궁형충AMA1신호태적PCR인물,이궁형충cDNA위모판진행PCR확증,PCR확증산물매절후여pGEX-4T-3원핵표체재체련접,병전화도BL21감수태세포내.대경PCR감정위양성적중조질립pGEX-4T-3-AMA1진행체외유도표체.[결과]성공구건료궁형충AMA1적원핵표체질립pGEX-4T-3-AMA1,통과체외유도표명,AMA1융합단백시이포함체적형식존재.[결론]궁형충AMA1단백적체외표체위진일보제비항AMA1혈청급면역학실험전정료기출.
