分子植物育种
分子植物育種
분자식물육충
MOLECULAR PLANT BREEDING
2011年
2期
174-179
,共6页
张玉%白史且%李聪%李达旭%邓永昌%王涌鑫
張玉%白史且%李聰%李達旭%鄧永昌%王湧鑫
장옥%백사차%리총%리체욱%산영창%왕용흠
绿色荧光蛋白(GFP)%γ-zein基因%植物表达载体%亚细胞定位
綠色熒光蛋白(GFP)%γ-zein基因%植物錶達載體%亞細胞定位
록색형광단백(GFP)%γ-zein기인%식물표체재체%아세포정위
用PCR方法从pROK.TG1LK扩增得到γ-zein基因的全长,克隆到中间载体pMD18-T,获得了重组质粒pMD18-γ-zein,分别用Nco Ⅰ和Bgl Ⅱ 2种限制性内切酶酶切重组质粒和经过改良的pCAMBIAI 1302载体,经回收、连接、转化、鉴定后,构建了由35S驱动的绿色荧光蛋白(GFP)融合的植物表达载体pCB-GFP-γ-zein,用基因枪法将GFP-γ-zein基因整合到洋葱表皮细胞中,通过共聚焦显微镜观察,该融合基因在洋葱表皮细胞的细胞壁、细胞核和细胞质中得到了表达.
用PCR方法從pROK.TG1LK擴增得到γ-zein基因的全長,剋隆到中間載體pMD18-T,穫得瞭重組質粒pMD18-γ-zein,分彆用Nco Ⅰ和Bgl Ⅱ 2種限製性內切酶酶切重組質粒和經過改良的pCAMBIAI 1302載體,經迴收、連接、轉化、鑒定後,構建瞭由35S驅動的綠色熒光蛋白(GFP)融閤的植物錶達載體pCB-GFP-γ-zein,用基因鎗法將GFP-γ-zein基因整閤到洋蔥錶皮細胞中,通過共聚焦顯微鏡觀察,該融閤基因在洋蔥錶皮細胞的細胞壁、細胞覈和細胞質中得到瞭錶達.
용PCR방법종pROK.TG1LK확증득도γ-zein기인적전장,극륭도중간재체pMD18-T,획득료중조질립pMD18-γ-zein,분별용Nco Ⅰ화Bgl Ⅱ 2충한제성내절매매절중조질립화경과개량적pCAMBIAI 1302재체,경회수、련접、전화、감정후,구건료유35S구동적록색형광단백(GFP)융합적식물표체재체pCB-GFP-γ-zein,용기인창법장GFP-γ-zein기인정합도양총표피세포중,통과공취초현미경관찰,해융합기인재양총표피세포적세포벽、세포핵화세포질중득도료표체.
