中国病理生理杂志
中國病理生理雜誌
중국병리생리잡지
CHINESE JOURNAL OF PATHOPHYSIOLOGY
2011年
2期
332-337
,共6页
韦喆%张金明%安庚%冀晨阳%潘淑娟
韋喆%張金明%安庚%冀晨暘%潘淑娟
위철%장금명%안경%기신양%반숙연
肌源性干细胞%Preplate技术%细胞表型%CD34%干细胞抗原1%蛋白质Bcl-2%结蛋白
肌源性榦細胞%Preplate技術%細胞錶型%CD34%榦細胞抗原1%蛋白質Bcl-2%結蛋白
기원성간세포%Preplate기술%세포표형%CD34%간세포항원1%단백질Bcl-2%결단백
目的:探讨小鼠肌源性干细胞(MDSCs)的生物学特性和表型.方法:取小鼠骨骼肌,用酶分步消化,应用差速贴壁法进行纯化获取MDSCs,观察细胞的形态,对MDSCs分别进行增殖能力、克隆形成率和融合情况等鉴定;通过流式细胞术、免疫荧光法及免疫印迹法(Western blotting)等检测初步确定细胞表型.结果:经差速贴壁法获取的MDSCs为圆形或短梭形细胞,聚集成簇,呈对数生长;细胞倍增时间(9.69±2.08)h,克隆形成率(13.35±2.54)%;细胞在高汇合度(＞50%)或低血清(2%FBS)培养时,极易融合成肌管或肌细胞链;流式细胞术和免疫荧光技术鉴定:CD34、Sca-1、Bcl-2和desmin在原代MDSCs中的表达均＞90%;Western blotting检测显示随着细胞的纯化, desmin表达越来越强,α-SMA表达越来越弱.结论:MDSCs通过差速贴壁法获取时纯度较高,它具有高水平表达CD34、Sca-1、Bcl-2和desmin的生物学特性,这4种蛋白可作为鉴定MDSCs的标志物.MDSCs增殖旺盛,可在体外大量扩增,是组织工程研究的一种新型种子细胞.
目的:探討小鼠肌源性榦細胞(MDSCs)的生物學特性和錶型.方法:取小鼠骨骼肌,用酶分步消化,應用差速貼壁法進行純化穫取MDSCs,觀察細胞的形態,對MDSCs分彆進行增殖能力、剋隆形成率和融閤情況等鑒定;通過流式細胞術、免疫熒光法及免疫印跡法(Western blotting)等檢測初步確定細胞錶型.結果:經差速貼壁法穫取的MDSCs為圓形或短梭形細胞,聚集成簇,呈對數生長;細胞倍增時間(9.69±2.08)h,剋隆形成率(13.35±2.54)%;細胞在高彙閤度(＞50%)或低血清(2%FBS)培養時,極易融閤成肌管或肌細胞鏈;流式細胞術和免疫熒光技術鑒定:CD34、Sca-1、Bcl-2和desmin在原代MDSCs中的錶達均＞90%;Western blotting檢測顯示隨著細胞的純化, desmin錶達越來越彊,α-SMA錶達越來越弱.結論:MDSCs通過差速貼壁法穫取時純度較高,它具有高水平錶達CD34、Sca-1、Bcl-2和desmin的生物學特性,這4種蛋白可作為鑒定MDSCs的標誌物.MDSCs增殖旺盛,可在體外大量擴增,是組織工程研究的一種新型種子細胞.
목적:탐토소서기원성간세포(MDSCs)적생물학특성화표형.방법:취소서골격기,용매분보소화,응용차속첩벽법진행순화획취MDSCs,관찰세포적형태,대MDSCs분별진행증식능력、극륭형성솔화융합정황등감정;통과류식세포술、면역형광법급면역인적법(Western blotting)등검측초보학정세포표형.결과:경차속첩벽법획취적MDSCs위원형혹단사형세포,취집성족,정대수생장;세포배증시간(9.69±2.08)h,극륭형성솔(13.35±2.54)%;세포재고회합도(＞50%)혹저혈청(2%FBS)배양시,겁역융합성기관혹기세포련;류식세포술화면역형광기술감정:CD34、Sca-1、Bcl-2화desmin재원대MDSCs중적표체균＞90%;Western blotting검측현시수착세포적순화, desmin표체월래월강,α-SMA표체월래월약.결론:MDSCs통과차속첩벽법획취시순도교고,타구유고수평표체CD34、Sca-1、Bcl-2화desmin적생물학특성,저4충단백가작위감정MDSCs적표지물.MDSCs증식왕성,가재체외대량확증,시조직공정연구적일충신형충자세포.
