CAJ | 학술논문

根据猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)核酸序列设计引物,用RT-PCR扩增出PRRSV甘肃株的核衣壳蛋白(N)基因,将N基因克隆至pGEM-T easy载体上,获得含N基因的阳性重组质粒pGEM-T easy-N.对质粒中的插入片段进行测序,应用DNAStar分析所测序列与GenBank中已登录的PRRSV毒株的同源性,再将其亚克隆至原核表达载体pGEX-4T-1中,得到重组表达载体pGEX-4T-1-N,转化E.coli BL21(DE3)细胞.用SDS-PAGE检测表达产物,并对其进行纯化.结果表明:PRRSV甘肃株N基因核甘酸序列与PRRSV-VR2332株的同源性为93.3%,与欧洲LV株的同源性为66.1%;构建的重组表达载体在大肠杆菌中获得了成功表达,表达产物为40ku的可溶性融合蛋白.
근거저번식여호흡종합정병독(PRRSV)핵산서렬설계인물,용RT-PCR확증출PRRSV감숙주적핵의각단백(N)기인,장N기인극륭지pGEM-T easy재체상,획득함N기인적양성중조질립pGEM-T easy-N.대질립중적삽입편단진행측서,응용DNAStar분석소측서렬여GenBank중이등록적PRRSV독주적동원성,재장기아극륭지원핵표체재체pGEX-4T-1중,득도중조표체재체pGEX-4T-1-N,전화E.coli BL21(DE3)세포.용SDS-PAGE검측표체산물,병대기진행순화.결과표명:PRRSV감숙주N기인핵감산서렬여PRRSV-VR2332주적동원성위93.3%,여구주LV주적동원성위66.1%;구건적중조표체재체재대장간균중획득료성공표체,표체산물위40ku적가용성융합단백.