细胞与分子免疫学杂志
細胞與分子免疫學雜誌
세포여분자면역학잡지
2008年
12期
1150-1153
,共4页
林羡屏%黄月红%郑伟达%陈运新%陈治新%王小众
林羨屏%黃月紅%鄭偉達%陳運新%陳治新%王小衆
림이병%황월홍%정위체%진운신%진치신%왕소음
原代肝细胞%IL-10%IL10R%细胞增殖
原代肝細胞%IL-10%IL10R%細胞增殖
원대간세포%IL-10%IL10R%세포증식
目的:探讨IL-10对体外培养大鼠原代肝细胞增殖的影响.方法:胶原蛋白酶原位灌流法分离大鼠肝细胞,RT-PCR法检测肝内不同细胞标志基因的表达情况,对比原代肝细胞与大鼠正常肝组织的检测结果,进行细胞纯度鉴定;RT-PCR法检测原代肝细胞IL-10和IL-10受体α(IL10Rα)的表达情况;原代肝细胞分3组培养:正常组(N组)、对照组(C组)和IL-10干预组(I组);通过MTT分析、台盼兰细胞计数以及流式细胞术检测DNA含量等方法,了解外源性IL-10对肝细胞增殖的影响.结果:细胞鉴定结果显示,所有的标志基因在肝组织都可检测到有较高的表达,原代肝细胞虽高表达肝细胞标志基因,而肝内其他细胞的标志基因则不表达或低表达.RT-PCR检测显示原代肝细胞可表达IL-10和IL10Rα.台盼兰细胞计数提示IL-10干预48 h,I组平均细胞数仅为C组的71.96%(P<0.05);MTT检测亦显示IL-10干预24、 48 h,I组吸光度值分别为C组的88.41%与90.24%(P<0.05);流式细胞术检测结果表明IL-10干预24 h,I组肝细胞峰DNA含量是C组的59.06%,I组较C组降低(P<0.01),甚至低于N组(P<0.01).结论:分离的原代肝细胞纯度较高,大鼠原代肝细胞表达IL-10/IL10R mRNA,IL-10抑制大鼠原代肝细胞增殖.
目的:探討IL-10對體外培養大鼠原代肝細胞增殖的影響.方法:膠原蛋白酶原位灌流法分離大鼠肝細胞,RT-PCR法檢測肝內不同細胞標誌基因的錶達情況,對比原代肝細胞與大鼠正常肝組織的檢測結果,進行細胞純度鑒定;RT-PCR法檢測原代肝細胞IL-10和IL-10受體α(IL10Rα)的錶達情況;原代肝細胞分3組培養:正常組(N組)、對照組(C組)和IL-10榦預組(I組);通過MTT分析、檯盼蘭細胞計數以及流式細胞術檢測DNA含量等方法,瞭解外源性IL-10對肝細胞增殖的影響.結果:細胞鑒定結果顯示,所有的標誌基因在肝組織都可檢測到有較高的錶達,原代肝細胞雖高錶達肝細胞標誌基因,而肝內其他細胞的標誌基因則不錶達或低錶達.RT-PCR檢測顯示原代肝細胞可錶達IL-10和IL10Rα.檯盼蘭細胞計數提示IL-10榦預48 h,I組平均細胞數僅為C組的71.96%(P<0.05);MTT檢測亦顯示IL-10榦預24、 48 h,I組吸光度值分彆為C組的88.41%與90.24%(P<0.05);流式細胞術檢測結果錶明IL-10榦預24 h,I組肝細胞峰DNA含量是C組的59.06%,I組較C組降低(P<0.01),甚至低于N組(P<0.01).結論:分離的原代肝細胞純度較高,大鼠原代肝細胞錶達IL-10/IL10R mRNA,IL-10抑製大鼠原代肝細胞增殖.
목적:탐토IL-10대체외배양대서원대간세포증식적영향.방법:효원단백매원위관류법분리대서간세포,RT-PCR법검측간내불동세포표지기인적표체정황,대비원대간세포여대서정상간조직적검측결과,진행세포순도감정;RT-PCR법검측원대간세포IL-10화IL-10수체α(IL10Rα)적표체정황;원대간세포분3조배양:정상조(N조)、대조조(C조)화IL-10간예조(I조);통과MTT분석、태반란세포계수이급류식세포술검측DNA함량등방법,료해외원성IL-10대간세포증식적영향.결과:세포감정결과현시,소유적표지기인재간조직도가검측도유교고적표체,원대간세포수고표체간세포표지기인,이간내기타세포적표지기인칙불표체혹저표체.RT-PCR검측현시원대간세포가표체IL-10화IL10Rα.태반란세포계수제시IL-10간예48 h,I조평균세포수부위C조적71.96%(P<0.05);MTT검측역현시IL-10간예24、 48 h,I조흡광도치분별위C조적88.41%여90.24%(P<0.05);류식세포술검측결과표명IL-10간예24 h,I조간세포봉DNA함량시C조적59.06%,I조교C조강저(P<0.01),심지저우N조(P<0.01).결론:분리적원대간세포순도교고,대서원대간세포표체IL-10/IL10R mRNA,IL-10억제대서원대간세포증식.