CAJ | 학술논문

用重氮化法将SDM(磺胺二甲氧嘧啶)偶联于载体蛋白BSA和OVA,合成免疫原BSA-SDM和包被原OVA-SDM,并用紫外扫描(UV)、SDS-PAGE进行鉴定;用BSA-SDM免疫BALB/C小鼠,间接ELISA和阻断ELISA选择细胞融合备用鼠;应用杂交瘤技术建立分泌SDM mAb细胞株,用体内诱生腹水法制备SDM mAb;对SDM mAb的效价、亲和性、敏感性和特异性等免疫学特性进行鉴定.结果表明,BSA-SDM人工抗原制备成功,分子结合比约为1:12.1;筛选出184、3D9、4E1共3株敏感特异的杂交瘤细胞,间接ELISA效价细胞培养上清分别为1:3.2×102、1:5.12×102、1:8.1×102,腹水分别为1:2.56×105、1:2.56x 105、1:5.12×105,4El亲和常数(Ka)为1.25×1010mL/mol;4E1株对SDM的IC50为16.64ng/ml,与磺胺-6-甲氧嘧啶交叉反应率为5%,与其他磺胺类药物无交叉反应性.本试验获得了抗SDM高价、敏感、特异的mAb,可用于SDM残留检测的免疫学试验.
용중담화법장SDM(광알이갑양밀정)우련우재체단백BSA화OVA,합성면역원BSA-SDM화포피원OVA-SDM,병용자외소묘(UV)、SDS-PAGE진행감정;용BSA-SDM면역BALB/C소서,간접ELISA화조단ELISA선택세포융합비용서;응용잡교류기술건립분비SDM mAb세포주,용체내유생복수법제비SDM mAb;대SDM mAb적효개、친화성、민감성화특이성등면역학특성진행감정.결과표명,BSA-SDM인공항원제비성공,분자결합비약위1:12.1;사선출184、3D9、4E1공3주민감특이적잡교류세포,간접ELISA효개세포배양상청분별위1:3.2×102、1:5.12×102、1:8.1×102,복수분별위1:2.56×105、1:2.56x 105、1:5.12×105,4El친화상수(Ka)위1.25×1010mL/mol;4E1주대SDM적IC50위16.64ng/ml,여광알-6-갑양밀정교차반응솔위5%,여기타광알류약물무교차반응성.본시험획득료항SDM고개、민감、특이적mAb,가용우SDM잔류검측적면역학시험.