解剖学报
解剖學報
해부학보
ACTA ANATOMICA SINICA
2008年
6期
836-840
,共5页
徐燕%冯丽娜%唐琪%冉玉琴%慕晓玲
徐燕%馮麗娜%唐琪%冉玉琴%慕曉玲
서연%풍려나%당기%염옥금%모효령
人骨髓间充质干细胞%端粒酶催化亚基%永生化%四甲基偶氮唑蓝法
人骨髓間充質榦細胞%耑粒酶催化亞基%永生化%四甲基偶氮唑藍法
인골수간충질간세포%단립매최화아기%영생화%사갑기우담서람법
目的 研究稳定表达端粒酶催化亚基的人骨髓间充质干细胞(hBMSCs)生物学特性. 方法 用含有人端粒酶返转录酶(hTERT)基因的反转录病毒质粒pBabepuro-hTERT感染hBMSCs,经嘌呤霉素(puro)筛选出转基因细胞,我们将其命名为hTERT-hBMSCs.采用TRAP-ELISA法检测hBMSCs细胞转染前后端粒酶活件的变化;采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法,染色体核型分析,测量平板克隆形成率,成骨诱导等方法 对hTERT-hBMSCs细胞生物学特性进行分析. 结果 TRAP-ELISA法检测转染hTERT的hBMSCs的端粒酶为阳性;hTERT-hBMSCs细胞表面抗原CD44表达阳性,CD34阴性;hTERT-hBMSCs比hBMSCs增殖活跃,目前已传了11代,尚未见衰老迹象,其染色体数目和结构正常,未见畸变;克隆形成率较低,为正常细胞;并保持于细胞成骨分化潜能.结论 将外源性hTERT基因转入hBMSCs后,不影响其生物学特性和分化功能.
目的 研究穩定錶達耑粒酶催化亞基的人骨髓間充質榦細胞(hBMSCs)生物學特性. 方法 用含有人耑粒酶返轉錄酶(hTERT)基因的反轉錄病毒質粒pBabepuro-hTERT感染hBMSCs,經嘌呤黴素(puro)篩選齣轉基因細胞,我們將其命名為hTERT-hBMSCs.採用TRAP-ELISA法檢測hBMSCs細胞轉染前後耑粒酶活件的變化;採用四甲基偶氮唑藍(MTT)法,染色體覈型分析,測量平闆剋隆形成率,成骨誘導等方法 對hTERT-hBMSCs細胞生物學特性進行分析. 結果 TRAP-ELISA法檢測轉染hTERT的hBMSCs的耑粒酶為暘性;hTERT-hBMSCs細胞錶麵抗原CD44錶達暘性,CD34陰性;hTERT-hBMSCs比hBMSCs增殖活躍,目前已傳瞭11代,尚未見衰老跡象,其染色體數目和結構正常,未見畸變;剋隆形成率較低,為正常細胞;併保持于細胞成骨分化潛能.結論 將外源性hTERT基因轉入hBMSCs後,不影響其生物學特性和分化功能.
목적 연구은정표체단립매최화아기적인골수간충질간세포(hBMSCs)생물학특성. 방법 용함유인단립매반전록매(hTERT)기인적반전록병독질립pBabepuro-hTERT감염hBMSCs,경표령매소(puro)사선출전기인세포,아문장기명명위hTERT-hBMSCs.채용TRAP-ELISA법검측hBMSCs세포전염전후단립매활건적변화;채용사갑기우담서람(MTT)법,염색체핵형분석,측량평판극륭형성솔,성골유도등방법 대hTERT-hBMSCs세포생물학특성진행분석. 결과 TRAP-ELISA법검측전염hTERT적hBMSCs적단립매위양성;hTERT-hBMSCs세포표면항원CD44표체양성,CD34음성;hTERT-hBMSCs비hBMSCs증식활약,목전이전료11대,상미견쇠로적상,기염색체수목화결구정상,미견기변;극륭형성솔교저,위정상세포;병보지우세포성골분화잠능.결론 장외원성hTERT기인전입hBMSCs후,불영향기생물학특성화분화공능.
