中国比较医学杂志
中國比較醫學雜誌
중국비교의학잡지
CHINESE JOURNAL OF COMPARATIVE MEDICINE
2008年
5期
50-53
,共4页
陈锡福%刘星%张丽芳%李红
陳錫福%劉星%張麗芳%李紅
진석복%류성%장려방%리홍
胆汁螺杆菌%杂交瘤技术%单克隆抗体
膽汁螺桿菌%雜交瘤技術%單剋隆抗體
담즙라간균%잡교류기술%단극륭항체
目的 制备抗胆汁螺杆菌单克隆抗体(McAbs).方法 用胆汁螺杆菌B2m株皮下免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术进行融合.以酶联免疫吸附实验(ELISA)筛选抗胆汁螺杆菌单克隆杂交瘤细胞株并初步鉴定其特异性;免疫印迹试验测定单抗所结合的抗原表位;免疫双向扩散试验确定IgG亚类;腹腔接种法、辛酸-硫酸铵盐析法大量制备、纯化单克隆抗体.结果 经过ELISA筛选获得11个阳性杂交瘤细胞株,其效价最高达1.4×105以上,并与实验动物常见的15种病原菌呈阴性反应;IgG亚类为IgC2a和IgG2b;免疫印迹试验显示,6株(A～F)与胆汁螺杆菌大约相对分子质量(17、20、21、30、52、66)×103的抗原特异结合,5株(G～K)皆与胆汁螺杆菌、幽门螺杆菌等三种螺杆菌大约相对分子质量(52、82)×103的抗原呈阳性反应,表明A～F株针对的是胆汁螺杆菌特异性抗原,G～K株可能具有属特异性.结论 筛选的单克隆抗体具有较高的特异性和敏感性,所结合的抗原为胆汁螺杆菌或螺杆菌的免疫优势抗原,为进一步的种、属生物学特性研究、菌株分型及血清学检测方法建立等奠定了基础.
目的 製備抗膽汁螺桿菌單剋隆抗體(McAbs).方法 用膽汁螺桿菌B2m株皮下免疫BALB/c小鼠,採用雜交瘤技術進行融閤.以酶聯免疫吸附實驗(ELISA)篩選抗膽汁螺桿菌單剋隆雜交瘤細胞株併初步鑒定其特異性;免疫印跡試驗測定單抗所結閤的抗原錶位;免疫雙嚮擴散試驗確定IgG亞類;腹腔接種法、辛痠-硫痠銨鹽析法大量製備、純化單剋隆抗體.結果 經過ELISA篩選穫得11箇暘性雜交瘤細胞株,其效價最高達1.4×105以上,併與實驗動物常見的15種病原菌呈陰性反應;IgG亞類為IgC2a和IgG2b;免疫印跡試驗顯示,6株(A～F)與膽汁螺桿菌大約相對分子質量(17、20、21、30、52、66)×103的抗原特異結閤,5株(G～K)皆與膽汁螺桿菌、幽門螺桿菌等三種螺桿菌大約相對分子質量(52、82)×103的抗原呈暘性反應,錶明A～F株針對的是膽汁螺桿菌特異性抗原,G～K株可能具有屬特異性.結論 篩選的單剋隆抗體具有較高的特異性和敏感性,所結閤的抗原為膽汁螺桿菌或螺桿菌的免疫優勢抗原,為進一步的種、屬生物學特性研究、菌株分型及血清學檢測方法建立等奠定瞭基礎.
목적 제비항담즙라간균단극륭항체(McAbs).방법 용담즙라간균B2m주피하면역BALB/c소서,채용잡교류기술진행융합.이매련면역흡부실험(ELISA)사선항담즙라간균단극륭잡교류세포주병초보감정기특이성;면역인적시험측정단항소결합적항원표위;면역쌍향확산시험학정IgG아류;복강접충법、신산-류산안염석법대량제비、순화단극륭항체.결과 경과ELISA사선획득11개양성잡교류세포주,기효개최고체1.4×105이상,병여실험동물상견적15충병원균정음성반응;IgG아류위IgC2a화IgG2b;면역인적시험현시,6주(A～F)여담즙라간균대약상대분자질량(17、20、21、30、52、66)×103적항원특이결합,5주(G～K)개여담즙라간균、유문라간균등삼충라간균대약상대분자질량(52、82)×103적항원정양성반응,표명A～F주침대적시담즙라간균특이성항원,G～K주가능구유속특이성.결론 사선적단극륭항체구유교고적특이성화민감성,소결합적항원위담즙라간균혹라간균적면역우세항원,위진일보적충、속생물학특성연구、균주분형급혈청학검측방법건립등전정료기출.
