安徽医科大学学报
安徽醫科大學學報
안휘의과대학학보
ACTA UNIVERSITY MEDICINALIS ANHUI
2008年
2期
143-147
,共5页
王嵘峰%陈荣志%薛绍礼%任明山
王嶸峰%陳榮誌%薛紹禮%任明山
왕영봉%진영지%설소례%임명산
间质干细胞%细胞分化%神经元%神经胶质%巯基乙醇%细胞培养技术
間質榦細胞%細胞分化%神經元%神經膠質%巰基乙醇%細胞培養技術
간질간세포%세포분화%신경원%신경효질%구기을순%세포배양기술
目的 探讨β-巯基乙醇(BME)和大鼠脑匀浆上清对大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)分化为类神经元样细胞的作用.方法 采用全骨髓培养法从SD大鼠骨髓中分离培养MSCs,经贴壁法体外扩增、传代和流式细胞仪鉴定.①以1mmol/L浓度BME的含血清:DMEM培养基预诱导24h,再以含5mmol/LBME的无血清DMEM培养基诱导5h至MSCs神经分化.②使用大鼠脑匀浆上清诱导MSCs,48h至神经分化.免疫细胞化学染色分别检测两种诱导方法MSCs培养物神经元特异性烯醇化酶(NSE)和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达.结果 第5代MSCs有97.5%表达CD90抗原,1.72%表达CD45抗原.两种方法诱导后的细胞均具有神经细胞的形态特征;相比脑匀浆上清BME诱导组细胞形态变化更快.两种方法都可诱导MSCs表达NSE;鼠脑匀浆上清可诱导MSCs表达GFAP.结论 MSCs具有向神经细胞分化的可塑性,相比BME,鼠脑匀浆上清具有诱导MSCs向胶质细胞分化的倾向.
目的 探討β-巰基乙醇(BME)和大鼠腦勻漿上清對大鼠骨髓間充質榦細胞(MSCs)分化為類神經元樣細胞的作用.方法 採用全骨髓培養法從SD大鼠骨髓中分離培養MSCs,經貼壁法體外擴增、傳代和流式細胞儀鑒定.①以1mmol/L濃度BME的含血清:DMEM培養基預誘導24h,再以含5mmol/LBME的無血清DMEM培養基誘導5h至MSCs神經分化.②使用大鼠腦勻漿上清誘導MSCs,48h至神經分化.免疫細胞化學染色分彆檢測兩種誘導方法MSCs培養物神經元特異性烯醇化酶(NSE)和膠質纖維痠性蛋白(GFAP)的錶達.結果 第5代MSCs有97.5%錶達CD90抗原,1.72%錶達CD45抗原.兩種方法誘導後的細胞均具有神經細胞的形態特徵;相比腦勻漿上清BME誘導組細胞形態變化更快.兩種方法都可誘導MSCs錶達NSE;鼠腦勻漿上清可誘導MSCs錶達GFAP.結論 MSCs具有嚮神經細胞分化的可塑性,相比BME,鼠腦勻漿上清具有誘導MSCs嚮膠質細胞分化的傾嚮.
목적 탐토β-구기을순(BME)화대서뇌균장상청대대서골수간충질간세포(MSCs)분화위류신경원양세포적작용.방법 채용전골수배양법종SD대서골수중분리배양MSCs,경첩벽법체외확증、전대화류식세포의감정.①이1mmol/L농도BME적함혈청:DMEM배양기예유도24h,재이함5mmol/LBME적무혈청DMEM배양기유도5h지MSCs신경분화.②사용대서뇌균장상청유도MSCs,48h지신경분화.면역세포화학염색분별검측량충유도방법MSCs배양물신경원특이성희순화매(NSE)화효질섬유산성단백(GFAP)적표체.결과 제5대MSCs유97.5%표체CD90항원,1.72%표체CD45항원.량충방법유도후적세포균구유신경세포적형태특정;상비뇌균장상청BME유도조세포형태변화경쾌.량충방법도가유도MSCs표체NSE;서뇌균장상청가유도MSCs표체GFAP.결론 MSCs구유향신경세포분화적가소성,상비BME,서뇌균장상청구유유도MSCs향효질세포분화적경향.