猪繁殖与呼吸综合征病毒M蛋白和SEA共表达核酸疫的构建及鉴定
저번식여호흡종합정병독M단백화SEA공표체핵산역적구건급감정
Construction and identification of DNA vaccine co-expressing M protein of porcine reproductive and respiratory syndrome virus and staphylococcalenterotoxin A
  • 万方数据
    中国兽医学报 중국수의학보
    CHINESE JOURNAL OF VETERINARY SCIENCE
    2008年 1期 9-11 ,共3页

    韩贞珍%金宁一%沈国顺%庄天中%孙中锋%李臻%付延军%李太元%李红文%郑敏

    한정진%금저일%침국순%장천중%손중봉%리진%부연군%리태원%리홍문%정민

    猪繁殖与呼吸综合征%表达%核酸疫苗 豬繁殖與呼吸綜閤徵%錶達%覈痠疫苗
    저번식여호흡종합정%표체%핵산역묘
    构建猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)M蛋白和金黄色葡萄球菌肠毒素A(SEA)共表达的核酸疫苗,并研究其表达产物的抗原性.将采自长春患PRRS病猪的组织剪碎充分研磨,提取病毒RNA后,用RT-PCR的方法特异性扩增PRRSV长春株的ORF6基因(M蛋白)片段.将该片段定向插入到载体pKS-SEA上,双酶切获得片段SEAORF6,再将其克隆到真核表达载体pVAXⅠ中,构建重组质粒pVAXⅠ-SEA-ORF6,转化大肠杆菌.经酶切鉴定后,将构建的阳性重组质粒在BHK细胞中表达.通过间接免疫荧光方法初步检测所表达蛋白的抗原性,用Western blot分析表达蛋白的特异性.结果表明,所构建的重组质粒pVAXⅠ-SEA-ORF6在BHK细胞中得到了表达,为进一步研究PRRSV基因工程疫苗奠定了基础.
    구건저번식여호흡종합정병독(PRRSV)M단백화금황색포도구균장독소A(SEA)공표체적핵산역묘,병연구기표체산물적항원성.장채자장춘환PRRS병저적조직전쇄충분연마,제취병독RNA후,용RT-PCR적방법특이성확증PRRSV장춘주적ORF6기인(M단백)편단.장해편단정향삽입도재체pKS-SEA상,쌍매절획득편단SEAORF6,재장기극륭도진핵표체재체pVAXⅠ중,구건중조질립pVAXⅠ-SEA-ORF6,전화대장간균.경매절감정후,장구건적양성중조질립재BHK세포중표체.통과간접면역형광방법초보검측소표체단백적항원성,용Western blot분석표체단백적특이성.결과표명,소구건적중조질립pVAXⅠ-SEA-ORF6재BHK세포중득도료표체,위진일보연구PRRSV기인공정역묘전정료기출.
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