中国生物化学与分子生物学报
中國生物化學與分子生物學報
중국생물화학여분자생물학보
CHINESE JOURNAL OF BIOCHEMISTRY AND MOLECULAR BIOLOGY
2008年
1期
89-94
,共6页
溶酶体相关4次跨膜蛋白B%食管癌%甲基化%CpG岛
溶酶體相關4次跨膜蛋白B%食管癌%甲基化%CpG島
용매체상관4차과막단백B%식관암%갑기화%CpG도
研究溶酶体相关4次跨膜蛋白B(lysosome associated protein transmembrane 4 beta,LAPTM4B)基因在食管癌中的表达,及其启动子区甲基化状态,为进一步揭示LAPTM4B在不同肿瘤中表达高低机理提供参考.采用半定量RT-PCR法,确定42对食管癌中LAPTM4B mRNA表达.采用5对肝癌中LAPTM4BmRNA表达做内对照(利用灰度值比较),分析该基因在食管癌中的表达强度.选取其中3对食管癌组织样品(癌组织和癌旁正常组织),提取基因组DNA,采用亚硫酸氢钠修饰法,联合基因测序法分析LAPTM4B启动子区是否有甲基化修饰位点存在.结果发现,在42对食管癌组织中,癌组织和癌旁正常组织LAPTM4B mRNA表达存在差异:癌组织中LAPTM4B mRNA表达阳性为37/42(88.1%),癌旁正常组织中LAPTM4BmRNA表达阳性为26/42(61.9%).经基因测序法分析3对食管癌组织经通用引物PCR扩增的片段,发现1例癌旁正常组织样品中有3个CpG位点.以上结果表明,LAPTM4B基因与肝癌比较在食管癌中低表达,其启动子区1例癌旁正常组织在靠近转录起始点上游-418、-416和-398位置,存在3个CpG位点,而其他2例癌旁正常组织和3例癌组织中,没有发现CpG位点.这提示,LAPTM4B基因启动子区甲基化是其表达调节的重要方式.
研究溶酶體相關4次跨膜蛋白B(lysosome associated protein transmembrane 4 beta,LAPTM4B)基因在食管癌中的錶達,及其啟動子區甲基化狀態,為進一步揭示LAPTM4B在不同腫瘤中錶達高低機理提供參攷.採用半定量RT-PCR法,確定42對食管癌中LAPTM4B mRNA錶達.採用5對肝癌中LAPTM4BmRNA錶達做內對照(利用灰度值比較),分析該基因在食管癌中的錶達彊度.選取其中3對食管癌組織樣品(癌組織和癌徬正常組織),提取基因組DNA,採用亞硫痠氫鈉脩飾法,聯閤基因測序法分析LAPTM4B啟動子區是否有甲基化脩飾位點存在.結果髮現,在42對食管癌組織中,癌組織和癌徬正常組織LAPTM4B mRNA錶達存在差異:癌組織中LAPTM4B mRNA錶達暘性為37/42(88.1%),癌徬正常組織中LAPTM4BmRNA錶達暘性為26/42(61.9%).經基因測序法分析3對食管癌組織經通用引物PCR擴增的片段,髮現1例癌徬正常組織樣品中有3箇CpG位點.以上結果錶明,LAPTM4B基因與肝癌比較在食管癌中低錶達,其啟動子區1例癌徬正常組織在靠近轉錄起始點上遊-418、-416和-398位置,存在3箇CpG位點,而其他2例癌徬正常組織和3例癌組織中,沒有髮現CpG位點.這提示,LAPTM4B基因啟動子區甲基化是其錶達調節的重要方式.
연구용매체상관4차과막단백B(lysosome associated protein transmembrane 4 beta,LAPTM4B)기인재식관암중적표체,급기계동자구갑기화상태,위진일보게시LAPTM4B재불동종류중표체고저궤리제공삼고.채용반정량RT-PCR법,학정42대식관암중LAPTM4B mRNA표체.채용5대간암중LAPTM4BmRNA표체주내대조(이용회도치비교),분석해기인재식관암중적표체강도.선취기중3대식관암조직양품(암조직화암방정상조직),제취기인조DNA,채용아류산경납수식법,연합기인측서법분석LAPTM4B계동자구시부유갑기화수식위점존재.결과발현,재42대식관암조직중,암조직화암방정상조직LAPTM4B mRNA표체존재차이:암조직중LAPTM4B mRNA표체양성위37/42(88.1%),암방정상조직중LAPTM4BmRNA표체양성위26/42(61.9%).경기인측서법분석3대식관암조직경통용인물PCR확증적편단,발현1례암방정상조직양품중유3개CpG위점.이상결과표명,LAPTM4B기인여간암비교재식관암중저표체,기계동자구1례암방정상조직재고근전록기시점상유-418、-416화-398위치,존재3개CpG위점,이기타2례암방정상조직화3례암조직중,몰유발현CpG위점.저제시,LAPTM4B기인계동자구갑기화시기표체조절적중요방식.
