生物技术通讯
生物技術通訊
생물기술통신
LETTERS IN BIOTECHNOLOGY
2007年
6期
935-938
,共4页
相磊%梁之昶%章振华%王学文%胡国良%徐福洲%石岗%陈小玲
相磊%樑之昶%章振華%王學文%鬍國良%徐福洲%石崗%陳小玲
상뢰%량지창%장진화%왕학문%호국량%서복주%석강%진소령
口蹄疫病毒%VP1基因%克隆%系统发育树%基因型
口蹄疫病毒%VP1基因%剋隆%繫統髮育樹%基因型
구제역병독%VP1기인%극륭%계통발육수%기인형
目的:将O、A、Asia-Ⅰ型等3株口蹄疫病毒(FMDV)VP3-VP1-2A区域的一个片段克隆到pMD18-T载体上,构建阳性重组质粒,并且鉴定3株病毒所属的基因型.方法:将从中国农业科学院兰州兽医研究所获得的O、A、Asia-Ⅰ型灭活FMDV提取RNA作为模板,采用RT-PCR技术扩增了VP3-VP1-2A区域的一个约1 070 bp的片段,包含了全部的VP1序列;将其克隆到pMD18-T载体上,鉴定后得到阳性重组质粒;将目的片段进行序列测定、分析、绘制系统发育树,进而确定各灭活病毒的基因型.结果与结论:经鉴定,O型灭活FMDV属Cathay基因型,它与该基因型3条参考毒株序列的相似性在87%以上;A型灭活FMDV与参考株的相似性差异较大,但在系统发育树上可以看出该毒株属于Asia基因型;Asia-Ⅰ型FMDV只有1个基因型,将测序结果在NCBI网站上BLAST,证实该灭活病毒为Asia-Ⅰ型.
目的:將O、A、Asia-Ⅰ型等3株口蹄疫病毒(FMDV)VP3-VP1-2A區域的一箇片段剋隆到pMD18-T載體上,構建暘性重組質粒,併且鑒定3株病毒所屬的基因型.方法:將從中國農業科學院蘭州獸醫研究所穫得的O、A、Asia-Ⅰ型滅活FMDV提取RNA作為模闆,採用RT-PCR技術擴增瞭VP3-VP1-2A區域的一箇約1 070 bp的片段,包含瞭全部的VP1序列;將其剋隆到pMD18-T載體上,鑒定後得到暘性重組質粒;將目的片段進行序列測定、分析、繪製繫統髮育樹,進而確定各滅活病毒的基因型.結果與結論:經鑒定,O型滅活FMDV屬Cathay基因型,它與該基因型3條參攷毒株序列的相似性在87%以上;A型滅活FMDV與參攷株的相似性差異較大,但在繫統髮育樹上可以看齣該毒株屬于Asia基因型;Asia-Ⅰ型FMDV隻有1箇基因型,將測序結果在NCBI網站上BLAST,證實該滅活病毒為Asia-Ⅰ型.
목적:장O、A、Asia-Ⅰ형등3주구제역병독(FMDV)VP3-VP1-2A구역적일개편단극륭도pMD18-T재체상,구건양성중조질립,병차감정3주병독소속적기인형.방법:장종중국농업과학원란주수의연구소획득적O、A、Asia-Ⅰ형멸활FMDV제취RNA작위모판,채용RT-PCR기술확증료VP3-VP1-2A구역적일개약1 070 bp적편단,포함료전부적VP1서렬;장기극륭도pMD18-T재체상,감정후득도양성중조질립;장목적편단진행서렬측정、분석、회제계통발육수,진이학정각멸활병독적기인형.결과여결론:경감정,O형멸활FMDV속Cathay기인형,타여해기인형3조삼고독주서렬적상사성재87%이상;A형멸활FMDV여삼고주적상사성차이교대,단재계통발육수상가이간출해독주속우Asia기인형;Asia-Ⅰ형FMDV지유1개기인형,장측서결과재NCBI망참상BLAST,증실해멸활병독위Asia-Ⅰ형.
