生物技术通讯
生物技術通訊
생물기술통신
LETTERS IN BIOTECHNOLOGY
2007年
5期
778-780
,共3页
李卫滨%兰小鹏%杨湘越%吴文冰
李衛濱%蘭小鵬%楊湘越%吳文冰
리위빈%란소붕%양상월%오문빙
环孢霉素A%适体%随机单链寡核苷酸序列文库
環孢黴素A%適體%隨機單鏈寡覈苷痠序列文庫
배포매소A%괄체%수궤단련과핵감산서렬문고
目的:运用指数富集的配体系统进化(SELEX)技术筛选并鉴定环孢霉素A(CsA)特异性适体.方法:合成全长78个核苷酸中间含35个随机序列的随机单链DNA(ssDNA)文库,通过SELEX方法,以CsA为靶标、磁珠为筛选介质,利用生物素-链亲和素-辣根过氧化物酶系统检测每轮ssDNA文库与CsA的亲和力,筛选针对CsA的适体,将最后一轮筛选产物克隆测序,并运用相关软件进行一级结构和二级结构分析.结果:经过10轮筛选,ssDNA文库与CsA的亲和力呈上升趋势,随机挑选的19个克隆适体根据一级结构的同源性可分为5个家族,二级结构预测以茎环(发夹)为主.结论:通过改良SELEX方法筛选得到了CsA特异性的适体.
目的:運用指數富集的配體繫統進化(SELEX)技術篩選併鑒定環孢黴素A(CsA)特異性適體.方法:閤成全長78箇覈苷痠中間含35箇隨機序列的隨機單鏈DNA(ssDNA)文庫,通過SELEX方法,以CsA為靶標、磁珠為篩選介質,利用生物素-鏈親和素-辣根過氧化物酶繫統檢測每輪ssDNA文庫與CsA的親和力,篩選針對CsA的適體,將最後一輪篩選產物剋隆測序,併運用相關軟件進行一級結構和二級結構分析.結果:經過10輪篩選,ssDNA文庫與CsA的親和力呈上升趨勢,隨機挑選的19箇剋隆適體根據一級結構的同源性可分為5箇傢族,二級結構預測以莖環(髮夾)為主.結論:通過改良SELEX方法篩選得到瞭CsA特異性的適體.
목적:운용지수부집적배체계통진화(SELEX)기술사선병감정배포매소A(CsA)특이성괄체.방법:합성전장78개핵감산중간함35개수궤서렬적수궤단련DNA(ssDNA)문고,통과SELEX방법,이CsA위파표、자주위사선개질,이용생물소-련친화소-랄근과양화물매계통검측매륜ssDNA문고여CsA적친화력,사선침대CsA적괄체,장최후일륜사선산물극륭측서,병운용상관연건진행일급결구화이급결구분석.결과:경과10륜사선,ssDNA문고여CsA적친화력정상승추세,수궤도선적19개극륭괄체근거일급결구적동원성가분위5개가족,이급결구예측이경배(발협)위주.결론:통과개량SELEX방법사선득도료CsA특이성적괄체.
