微生物学免疫学进展
微生物學免疫學進展
미생물학면역학진전
PROGRESS IN MICROBIOLOGY AND IMMUNOLOGY
2007年
3期
20-23
,共4页
毛晓燕%乔玉玲%王云天%熊颖%赵红
毛曉燕%喬玉玲%王雲天%熊穎%趙紅
모효연%교옥령%왕운천%웅영%조홍
破伤风C片段%原核表达%表达条件优化
破傷風C片段%原覈錶達%錶達條件優化
파상풍C편단%원핵표체%표체조건우화
HTSS以一株破伤风生产菌株基因组DNA为模板,通过上游引物中几个碱基的修改,PCR扩增出破伤风毒紊C片段(TTc)基因,构建了原核表达质粒pET-42(b)/TTc,在大肠杆菌BL21(DE3)中表达.重组蛋白分子量约50kD,表达量为22%,超声波破碎显示为可溶性重组蛋白.通过对培养基、诱导时间、诱导温度的优化,重组蛋白的表达量和可溶性均有提高.Western blotting检测表达产物可与破伤风C片段单克隆抗体产生特异的免疫反应.该工作为亚单位疫苗或载体蛋白的开发奠定了基础.
HTSS以一株破傷風生產菌株基因組DNA為模闆,通過上遊引物中幾箇堿基的脩改,PCR擴增齣破傷風毒紊C片段(TTc)基因,構建瞭原覈錶達質粒pET-42(b)/TTc,在大腸桿菌BL21(DE3)中錶達.重組蛋白分子量約50kD,錶達量為22%,超聲波破碎顯示為可溶性重組蛋白.通過對培養基、誘導時間、誘導溫度的優化,重組蛋白的錶達量和可溶性均有提高.Western blotting檢測錶達產物可與破傷風C片段單剋隆抗體產生特異的免疫反應.該工作為亞單位疫苗或載體蛋白的開髮奠定瞭基礎.
HTSS이일주파상풍생산균주기인조DNA위모판,통과상유인물중궤개감기적수개,PCR확증출파상풍독문C편단(TTc)기인,구건료원핵표체질립pET-42(b)/TTc,재대장간균BL21(DE3)중표체.중조단백분자량약50kD,표체량위22%,초성파파쇄현시위가용성중조단백.통과대배양기、유도시간、유도온도적우화,중조단백적표체량화가용성균유제고.Western blotting검측표체산물가여파상풍C편단단극륭항체산생특이적면역반응.해공작위아단위역묘혹재체단백적개발전정료기출.
