CAJ | 학술논문

目的:探讨端粒酶特异性核酶对A549肺癌细胞端粒酶活性、增殖和凋亡的影响.方法:构建人端粒酶锤头状核酶真核表达质粒,稳定转染人A549肺癌细胞株.RT-PCR法检测核酶的表达以及hTERT mRNA、hTR的含量,TRAP法测定细胞端粒酶活性,MTT法、流式细胞仪等测定细胞增殖及凋亡.结果:稳定转染核酶重组体的细胞克隆,均可以检测到核酶的表达,端粒酶活性被抑制, clonehTERT 1～6 和clonehTR(1、3、5)的平均端粒酶活性分别是空白对照组的(27±18)%和(36±13)%,P值分别为0.000和0.013;clonehTERT1～6 hTERT mRNA及clonehTR1～6 hTR含量下降,分别是空白对照组的(30±19)%和(49±17)%,P值分别为0.000和0.001;clonehTERT1、clonehTR3生长较空白对照组及阴性对照组减缓,凋亡率增加;而clonehTERT1又较clone hTR3生长慢,凋亡率高(凋亡率分别为21.5%和16.1%).结论:端粒酶特异性核酶能明显抑制端粒酶活性和细胞增殖,促进细胞凋亡;端粒酶hTERT mRNA可能是比端粒酶RNA更为理想的端粒酶抑制剂的靶点.
목적:탐토단립매특이성핵매대A549폐암세포단립매활성、증식화조망적영향.방법:구건인단립매추두상핵매진핵표체질립,은정전염인A549폐암세포주.RT-PCR법검측핵매적표체이급hTERT mRNA、hTR적함량,TRAP법측정세포단립매활성,MTT법、류식세포의등측정세포증식급조망.결과:은정전염핵매중조체적세포극륭,균가이검측도핵매적표체,단립매활성피억제, clonehTERT 1～6 화clonehTR(1、3、5)적평균단립매활성분별시공백대조조적(27±18)%화(36±13)%,P치분별위0.000화0.013;clonehTERT1～6 hTERT mRNA급clonehTR1～6 hTR함량하강,분별시공백대조조적(30±19)%화(49±17)%,P치분별위0.000화0.001;clonehTERT1、clonehTR3생장교공백대조조급음성대조조감완,조망솔증가;이clonehTERT1우교clone hTR3생장만,조망솔고(조망솔분별위21.5%화16.1%).결론:단립매특이성핵매능명현억제단립매활성화세포증식,촉진세포조망;단립매hTERT mRNA가능시비단립매RNA경위이상적단립매억제제적파점.