第三军医大学学报
第三軍醫大學學報
제삼군의대학학보
ACTA ACADEMIAE MEDICINAE MILITARIS TERTIAE
2007年
9期
810-813
,共4页
石东文%代飞%陈希炜%贺伟峰%胡晓红%罗高兴%吴军
石東文%代飛%陳希煒%賀偉峰%鬍曉紅%囉高興%吳軍
석동문%대비%진희위%하위봉%호효홍%라고흥%오군
hMSCs%CTLA-4Ig%基因转染%诱导成骨
hMSCs%CTLA-4Ig%基因轉染%誘導成骨
hMSCs%CTLA-4Ig%기인전염%유도성골
目的 通过腺病毒介导CTLA-4Ig基因转染人骨髓间充质干细胞(human marrow mesenchymal stem cells, hMSCs),观察被修饰细胞CTLA-4Ig蛋白表达情况,以及基因修饰对hMSCs诱导成骨特性的影响.方法 采用荧光显微镜观察腺病毒介导CTLA-4Ig基因转染hMSCs的绿色荧光蛋白表达,流式细胞术检测确定转染率,观察对比转染前后细胞形态和细胞周期,用免疫细胞化学方法检测转染hMSCs的CTLA-4Ig蛋白表达,转染hMSCs成骨诱导培养3周后进行成骨特异性标记检测.结果 分离培养的hMSCs CD105表达阳性, CD34表达阴性.重组腺病毒介导的CTLA-4Ig基因转染hMSCs的转染率为81.14%, CTLA-4Ig基因转染hMSCs(CTLA-4Ig-hMSCs)的形态无明显变化,生长良好.免疫细胞化学结果显示,CTLA-4Ig-hMSCs的CTLA-4Ig蛋白表达阳性,诱导培养3周的CTLA-4Ig-hMSCs,碱性磷酸酶染色呈强阳性,免疫细胞化学检测骨钙素表达阳性,钙的四环素荧光标记法显示细胞间有钙的沉积.结论 腺病毒介导的CTLA-4Ig基因转染hMSCs能够分泌CTLA-4Ig蛋白,并保持了成骨分化潜能,可用于异基因hMSCs作为骨组织工程种子细胞的应用研究.
目的 通過腺病毒介導CTLA-4Ig基因轉染人骨髓間充質榦細胞(human marrow mesenchymal stem cells, hMSCs),觀察被脩飾細胞CTLA-4Ig蛋白錶達情況,以及基因脩飾對hMSCs誘導成骨特性的影響.方法 採用熒光顯微鏡觀察腺病毒介導CTLA-4Ig基因轉染hMSCs的綠色熒光蛋白錶達,流式細胞術檢測確定轉染率,觀察對比轉染前後細胞形態和細胞週期,用免疫細胞化學方法檢測轉染hMSCs的CTLA-4Ig蛋白錶達,轉染hMSCs成骨誘導培養3週後進行成骨特異性標記檢測.結果 分離培養的hMSCs CD105錶達暘性, CD34錶達陰性.重組腺病毒介導的CTLA-4Ig基因轉染hMSCs的轉染率為81.14%, CTLA-4Ig基因轉染hMSCs(CTLA-4Ig-hMSCs)的形態無明顯變化,生長良好.免疫細胞化學結果顯示,CTLA-4Ig-hMSCs的CTLA-4Ig蛋白錶達暘性,誘導培養3週的CTLA-4Ig-hMSCs,堿性燐痠酶染色呈彊暘性,免疫細胞化學檢測骨鈣素錶達暘性,鈣的四環素熒光標記法顯示細胞間有鈣的沉積.結論 腺病毒介導的CTLA-4Ig基因轉染hMSCs能夠分泌CTLA-4Ig蛋白,併保持瞭成骨分化潛能,可用于異基因hMSCs作為骨組織工程種子細胞的應用研究.
목적 통과선병독개도CTLA-4Ig기인전염인골수간충질간세포(human marrow mesenchymal stem cells, hMSCs),관찰피수식세포CTLA-4Ig단백표체정황,이급기인수식대hMSCs유도성골특성적영향.방법 채용형광현미경관찰선병독개도CTLA-4Ig기인전염hMSCs적록색형광단백표체,류식세포술검측학정전염솔,관찰대비전염전후세포형태화세포주기,용면역세포화학방법검측전염hMSCs적CTLA-4Ig단백표체,전염hMSCs성골유도배양3주후진행성골특이성표기검측.결과 분리배양적hMSCs CD105표체양성, CD34표체음성.중조선병독개도적CTLA-4Ig기인전염hMSCs적전염솔위81.14%, CTLA-4Ig기인전염hMSCs(CTLA-4Ig-hMSCs)적형태무명현변화,생장량호.면역세포화학결과현시,CTLA-4Ig-hMSCs적CTLA-4Ig단백표체양성,유도배양3주적CTLA-4Ig-hMSCs,감성린산매염색정강양성,면역세포화학검측골개소표체양성,개적사배소형광표기법현시세포간유개적침적.결론 선병독개도적CTLA-4Ig기인전염hMSCs능구분비CTLA-4Ig단백,병보지료성골분화잠능,가용우이기인hMSCs작위골조직공정충자세포적응용연구.
