中国现代医学杂志
中國現代醫學雜誌
중국현대의학잡지
CHINA JOURNAL OF MODERN MEDICINE
2006年
2期
201-203,206
,共4页
李永奇%崔大祥%陈勇%韩锋产
李永奇%崔大祥%陳勇%韓鋒產
리영기%최대상%진용%한봉산
iNOS基因%排异反应%反义转基因载体
iNOS基因%排異反應%反義轉基因載體
iNOS기인%배이반응%반의전기인재체
目的克隆与排异反应密切相关的iNOS基因cDNA片段,并构建反义转基因载体.方法培养人血管内皮细胞HVEC细胞株,采用反转录-pCR方法获取iNOS cDNA基因片段,并克隆入T载体并进行序列分析.用HindⅢ与BamHI双酶切带有iNOS cDNA片段的T载体质粒与pCDNA5载体,回收酶切产物,连接,转化,提取质粒并酶切鉴定.结果RT-PCR获取了669 bp的iNOS基因片段;序列分析表明克隆的iNOS片段序列正确;双酶切分析显示克隆入pCDNA3载体的iNOS基因片段与预期的大小一致.结论克隆了iNOS基因片段,并构建了iNOS的反义转基因载体.
目的剋隆與排異反應密切相關的iNOS基因cDNA片段,併構建反義轉基因載體.方法培養人血管內皮細胞HVEC細胞株,採用反轉錄-pCR方法穫取iNOS cDNA基因片段,併剋隆入T載體併進行序列分析.用HindⅢ與BamHI雙酶切帶有iNOS cDNA片段的T載體質粒與pCDNA5載體,迴收酶切產物,連接,轉化,提取質粒併酶切鑒定.結果RT-PCR穫取瞭669 bp的iNOS基因片段;序列分析錶明剋隆的iNOS片段序列正確;雙酶切分析顯示剋隆入pCDNA3載體的iNOS基因片段與預期的大小一緻.結論剋隆瞭iNOS基因片段,併構建瞭iNOS的反義轉基因載體.
목적극륭여배이반응밀절상관적iNOS기인cDNA편단,병구건반의전기인재체.방법배양인혈관내피세포HVEC세포주,채용반전록-pCR방법획취iNOS cDNA기인편단,병극륭입T재체병진행서렬분석.용HindⅢ여BamHI쌍매절대유iNOS cDNA편단적T재체질립여pCDNA5재체,회수매절산물,련접,전화,제취질립병매절감정.결과RT-PCR획취료669 bp적iNOS기인편단;서렬분석표명극륭적iNOS편단서렬정학;쌍매절분석현시극륭입pCDNA3재체적iNOS기인편단여예기적대소일치.결론극륭료iNOS기인편단,병구건료iNOS적반의전기인재체.