CAJ | 학술논문

目的:应用差异显示技术,筛选鼻咽癌相关基因的异常表达.方法:选用连接有bax基因的真核表达质粒pSFFV-bax-neo,采用脂质体转染法,将其转染到CNE2细胞中,以转染有空载的pSFFV-neo质粒的CNE2细胞为对照,采用Trizol试剂快速抽取法,提取mRNA经逆转录成cDNA,用锚式引物和随机引物进行PCR扩增,加入同位素,用6%的测序变性聚丙烯酰胺凝胶上电泳PCR产物进行分离.切下聚丙烯酰胺凝胶上明显的6条差异带,回收差异cDNA,进行第二次PCR扩增,经低溶点琼脂凝胶回收,获取大量PCR扩增的差异cDNA片段,同位素标记作为探针,抽取RNA,进行点样,杂交,洗膜放射自显影等步骤,进行细胞RNA的Northern印迹斑点杂交.结果:表明4条cDNA片段均为CNE2细胞表达片段.结论:发现bax可诱导CNE2细胞中有某些相关基因表达,并抑制了CNE2细胞某些相关基因表达.
목적:응용차이현시기술,사선비인암상관기인적이상표체.방법:선용련접유bax기인적진핵표체질립pSFFV-bax-neo,채용지질체전염법,장기전염도CNE2세포중,이전염유공재적pSFFV-neo질립적CNE2세포위대조,채용Trizol시제쾌속추취법,제취mRNA경역전록성cDNA,용묘식인물화수궤인물진행PCR확증,가입동위소,용6%적측서변성취병희선알응효상전영PCR산물진행분리.절하취병희선알응효상명현적6조차이대,회수차이cDNA,진행제이차PCR확증,경저용점경지응효회수,획취대량PCR확증적차이cDNA편단,동위소표기작위탐침,추취RNA,진행점양,잡교,세막방사자현영등보취,진행세포RNA적Northern인적반점잡교.결과:표명4조cDNA편단균위CNE2세포표체편단.결론:발현bax가유도CNE2세포중유모사상관기인표체,병억제료CNE2세포모사상관기인표체.