感染、炎症、修复
感染、炎癥、脩複
감염、염증、수복
INFECTION， INFLAMMATION， REPAIR
2005年
1期
3-6
,共4页
屈纪富%史春梦%郑怀恩%郝利%程天民
屈紀富%史春夢%鄭懷恩%郝利%程天民
굴기부%사춘몽%정부은%학리%정천민
真皮多能干细胞%创伤愈合%抑制消减杂交
真皮多能榦細胞%創傷愈閤%抑製消減雜交
진피다능간세포%창상유합%억제소감잡교
目的:研究创伤早期伤口液作用前后真皮多能干细胞基因表达的变化,探讨真皮多能干细胞参与创伤修复启动的分子机制.方法:取伤后1d伤口液作为创伤修复启动微环境,刺激真皮多能干细胞,24h后提取总RNA为实验方(tester),未予刺激的真皮多能干细胞总RNA为驱动方(driver).实验方、驱动方总RNA由SMART cDNA方法合成cDNA,然后用抑制消减杂交(SSH)方法获得消减杂交产物.消减杂交产物克隆到T载体构建消减文库.对部分克隆进行杂交筛选及序列比对.结果:消减杂交文库挑取615个克隆进行PCR扩增,阳性率约为97%.取其中48个克隆进行反向Northern杂交,获得5个差异表达基因.经Genebank检索,这些差异表达基因与已知序列有较高同源性,其中大多为与创伤修复相关的基因.结论:我们成功构建了创伤早期伤口液刺激前后大鼠真皮多能干细胞差异表达cDNA文库,并筛选、克隆出部分与真皮多能干细胞参与创伤修复相关的差异表达基因.
目的:研究創傷早期傷口液作用前後真皮多能榦細胞基因錶達的變化,探討真皮多能榦細胞參與創傷脩複啟動的分子機製.方法:取傷後1d傷口液作為創傷脩複啟動微環境,刺激真皮多能榦細胞,24h後提取總RNA為實驗方(tester),未予刺激的真皮多能榦細胞總RNA為驅動方(driver).實驗方、驅動方總RNA由SMART cDNA方法閤成cDNA,然後用抑製消減雜交(SSH)方法穫得消減雜交產物.消減雜交產物剋隆到T載體構建消減文庫.對部分剋隆進行雜交篩選及序列比對.結果:消減雜交文庫挑取615箇剋隆進行PCR擴增,暘性率約為97%.取其中48箇剋隆進行反嚮Northern雜交,穫得5箇差異錶達基因.經Genebank檢索,這些差異錶達基因與已知序列有較高同源性,其中大多為與創傷脩複相關的基因.結論:我們成功構建瞭創傷早期傷口液刺激前後大鼠真皮多能榦細胞差異錶達cDNA文庫,併篩選、剋隆齣部分與真皮多能榦細胞參與創傷脩複相關的差異錶達基因.
목적:연구창상조기상구액작용전후진피다능간세포기인표체적변화,탐토진피다능간세포삼여창상수복계동적분자궤제.방법:취상후1d상구액작위창상수복계동미배경,자격진피다능간세포,24h후제취총RNA위실험방(tester),미여자격적진피다능간세포총RNA위구동방(driver).실험방、구동방총RNA유SMART cDNA방법합성cDNA,연후용억제소감잡교(SSH)방법획득소감잡교산물.소감잡교산물극륭도T재체구건소감문고.대부분극륭진행잡교사선급서렬비대.결과:소감잡교문고도취615개극륭진행PCR확증,양성솔약위97%.취기중48개극륭진행반향Northern잡교,획득5개차이표체기인.경Genebank검색,저사차이표체기인여이지서렬유교고동원성,기중대다위여창상수복상관적기인.결론:아문성공구건료창상조기상구액자격전후대서진피다능간세포차이표체cDNA문고,병사선、극륭출부분여진피다능간세포삼여창상수복상관적차이표체기인.
