小反刍兽疫病毒N基因的原核表达
소반추수역병독N기인적원핵표체
The Prokaryotic Expression of N Gene from Peste Des Petits Ruminants Virus
  • 万方数据
    动物医学进展 동물의학진전
    PROGRESS IN VETERINARY MEDICINE
    2011年 3期 21-25 ,共5页

    阮洋%秦峻岭%高玉伟%孙玮%张涛%杨玉姣%杨松涛%王承宇%王铁成%黄耕%夏咸柱

    원양%진준령%고옥위%손위%장도%양옥교%양송도%왕승우%왕철성%황경%하함주

    小反刍兽疫病毒N基因%原核表达%SDS-PAGE电泳%Western-blot 小反芻獸疫病毒N基因%原覈錶達%SDS-PAGE電泳%Western-blot
    소반추수역병독N기인%원핵표체%SDS-PAGE전영%Western-blot
    目的是表达出小反刍兽疫病毒的核蛋白,并鉴定其活性.根据GenBank发表的小反刍兽疫病毒(PPRV)Nigeria 75/1株N基因序列,对其进行基因优化并合成.设计引物,利用PCR的方法扩增PPRV-N基因,将该基因片段定向克隆到原核表达载体pET-28a(+)中,构建原核表达栽体pET-28a-N.阳性质粒转化原核表达宿主菌Transetta(DE3),用IPTG诱导表达并确定表达N基因的最佳诱导时间、温度.通过SDS-PAGE电泳和Western blot分析确定表达蛋白的表达量和活性.扩增出PPRV-N基因,构建的原核表达栽体pET-28a-N和原核表达菌,表达了N蛋白,表达蛋白能与PPRV阳性血清发生特异性反应.
    목적시표체출소반추수역병독적핵단백,병감정기활성.근거GenBank발표적소반추수역병독(PPRV)Nigeria 75/1주N기인서렬,대기진행기인우화병합성.설계인물,이용PCR적방법확증PPRV-N기인,장해기인편단정향극륭도원핵표체재체pET-28a(+)중,구건원핵표체재체pET-28a-N.양성질립전화원핵표체숙주균Transetta(DE3),용IPTG유도표체병학정표체N기인적최가유도시간、온도.통과SDS-PAGE전영화Western blot분석학정표체단백적표체량화활성.확증출PPRV-N기인,구건적원핵표체재체pET-28a-N화원핵표체균,표체료N단백,표체단백능여PPRV양성혈청발생특이성반응.
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